接种前需要提前准备哪些无菌器材

① 请教无菌接种步骤

博凌科为解答：无菌接种步骤：（1）将初步洗涤及切割的材料放入烧杯，带入超净台上，用消毒剂灭菌，再用无菌水冲洗，最后沥去水分，取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。（2）材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm平方的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含 1-2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。（3）用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程（以试管为例）是：先解开包口纸，将试管几乎水平拿着，使试管口靠近酒精灯火焰，并将管口在火焰上方转动，使管口里外灼烧数秒钟。若用棉塞盖口，可先在管口外面灼烧，去掉棉塞，再烧管口里面。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内，轻轻插入培养基上。若是叶片直接附在培养基上，以放1-3块为宜。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放（尖端向上）外，其他尚无统一要求。接种完后，将管口在火焰上再灼烧数秒种。并用棉塞，塞好后，包上包口纸，包口纸里面也要过火

② 在微生物实验室中无菌操作需要什么仪器

培养皿 培养基 枪头 移液枪 ep管 涂布器 酒精灯 等

③ 简述无菌接种室使用前的准备工作及使用后的处理方式

对无菌接种室怎样做好接种前的灭菌工作，湖南纯臻净化工程为您解答！
一、无菌操作环节
1、接种室应保持清洁，用煤粉酚皂液擦洗台面及墙壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均应用紫外灯灭菌；使用过程中，采用“NICOLER”动态杀菌机，此机器在工人上班时开机、过程中持续杀菌不允许关机，工人下班后同步关机，对人体无害处的同时，时时在线灭杀空气中的霉菌、枯草杆菌、沙门氏菌等杂菌。
2、进入接种室前，应先做好个人卫生工作，在缓冲间内要更换工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只准在接种室内使用。不准穿到其它地方去，并要定期更换、消毒。
3、接种的试管、三角并瓶等应做好标记，注明培养基、菌种的名称、日期。移入接种室内的所有物品，均须在缓冲室用70%酒精擦试干净。
4、接种前，双手采用自动感应手消毒器手部消毒，建议采用75%医用酒精作为消毒介质流程为：“感应给皂机洗手—水龙头冲洗—感应式烘干—感应式手消毒”；以首次杀菌后时间计算，以后每隔60-90分钟对手部重新消毒一次，阻隔手部细菌的滋生及繁衍。
5、培养箱及接种工具应经常清洁消毒；操作过程不离开酒精灯火焰；棉塞不乱放；接种工具使用前后均需火焰灭菌。
二、 接种室的空气消毒方法
1、紫外线消毒法，其杀菌机理是当其作用于生物体时，可导致细胞内核酸和酶发生光化学反应，而使细胞死亡。另外，紫外线还可使空气中的氧气产生臭氧，臭氧具有杀菌作用。
但对真菌效果差，只起辅助消毒作用，还需配合药物使用。由于紫外线对人体有伤害作用，不要在开启紫外灯的情况下工作。
2、臭氧发生器，能高效、快速杀灭空气中和物体表面各种微生物，接种成功率可达97％以上；同时具有性能稳定、操作简单、耗电小的特点。对人体有伤害作用，不要在有人的情况下工作。
3、“NICOLER动态空气消毒机”，对车间内的空气进行消毒，保证食品安全。该消毒技术对车间消毒时，人可同时在车间内工作，对人体没有任何危害，同时使受控环境保持在“无菌无尘”标准。
4、甲醛和高锰酸钾熏蒸法，使用方法是每立方米空间用8～10mL 40%甲醛和5～7g高锰酸钾，先将高锰酸钾倒入陶瓷或玻璃容器内，再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间消毒时20～30分钟。
三、接种室无菌程度检查方法
取无菌的营养琼脂平板，在接种室内台上和台下各放一套，把皿盖打开15min，然后盖好，倒置37℃恒温培养24-28小时，如果每个皿内菌落不超过4个，则可以认为无菌程度良好，若菌落很多，则应对接种室进一步灭菌。
以上及“对无菌接种室怎样做好接种前的灭菌工作”的相关资料，如有疑问可咨询“湖南纯臻净化工程公司”。

④ 无菌接种操作应注意哪些事项

无菌接种操作时应注意以下事项：
（1）接种前要准备好一些无菌棉塞，一起放入接种箱（室）内，以便在所用棉塞受潮时更换。
（2）接种时切勿使试管口、瓶口或培养皿开缝处离开酒精灯火焰的无菌区（火焰周围8～10厘米），但要注意不要烧伤菌种。
（3）接种时试管口、瓶口一般不向上，以减少杂菌污染机会。
（4）接种时人在室内尽量少走动，以减少空气流动扬起的灰尘污染。同时，应全部接种完待接种物后方可离开现场。
（5）接种时留下的火柴梗、菌种碎屑、用过的酒精棉球等杂物要及时清除，以免引起污染。
（6）如一次接种不同菌种时，要注意做好标记，以免使菌种混杂。

⑤ 请讲述无菌操作接种的全过程。

培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。

实验台面不论是什么材料，一律要求光滑、水平。光滑是便于用消毒剂擦洗；水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。在实验台上方，空气流动应缓慢，杂菌应尽量减少，其周围杂菌也应越少越好。为此，必须清扫室内，关闭实验室的门窗，并用消毒剂进行空气消毒处理，尽可能地减少杂菌的数量。

空气中的杂菌在气流小的情况下，随着灰尘落下，所以接种时，打开培养皿的时间应尽量短。用于接种的器具必须经干热或火焰等灭菌。接种环的火焰灭菌方法：通常接种环在火焰上充分烧红（接种柄，一边转动一边慢慢地来回通过火焰三次），冷却，先接触一下培养基，待接种环冷却到室温后，方可用它来挑取含菌材料或菌体，迅速地接种到新的培养基上。（图3－4）然后，将接种环从柄部至环端逐渐通过火焰灭菌，复原。不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体爆溅而污染空间。平板接种时，通常把平板的面倾斜，把培养皿的盖打开一小部分进行接种。在向培养皿内倒培养基或接种时，试管口或瓶壁外面不要接触底皿边，试管或瓶口应倾斜一下在火焰上通过。

⑥ 何谓无菌操作接种前应作哪些准备工作

无菌操作就是要求操作环境为无菌环境。例如在无菌室、超净工作台或酒精灯火焰10cm内都可视为为无菌环境；
在进行接种时不严格无菌操作就极有被环境微生物污染的可能，导致培养物出现杂菌，严重影响实验或生产。

⑦ "请阐述微生物接种时,无菌操作应该从哪些方面入手

微生物接种的时候进行无菌操作的时候应该在无菌，操作台也就是超净工作台上操作。同时手上还有一些相关的该消毒就要消毒。接触到的物品要用酒精燃烧或者其他方式进行灭菌。

⑧ 无菌操作要注意什么

无菌操作，是指在无菌室或超净台中进行以防止微生物进入人体或污染供试菌的操作技术，注意事项有：

1、环境要清洁

进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室应每天用紫外线消毒一次。

2、明确情节区域

在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。

3、确保准备工作

执行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并将手擦干，注意空气和环境清洁。

4、夹取无菌物品

必须使用无菌持物钳。 进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂、均不可直接接触无菌物品或超过无菌区取物。

无菌操作的技巧：

新购玻璃器皿应先用热肥皂水冲洗，再用自来水冲洗，再用1%-2%盐酸溶液浸泡除去游离碱，再用清水冲洗。对于试剂瓶、烧瓶或量具等容量较大的容器，用清水冲洗后，应注入少量浓盐酸，缓慢旋转，使盐酸覆盖容器内壁。几分钟后，应倒出盐酸，然后用水冲洗。

硝酸清洗液可制成50%的水溶液，用于微量滴定筒的清洗。用EDTA钠盐在5%～10%的水溶液中洗脱附着在玻璃器皿内壁上的白色沉淀物。尿素溶液尿素是溶解蛋白质的良好溶剂。适用于血液、血清等蛋白质清洗吸管和试管。

以上内容参考：网络—无菌操作

⑨ 培养基的制作至接种,哪些步骤要无菌操作

培养基制作好了以后要灭菌待用,接种的话,在超净工作台进行无菌操作,跟接种有关的东西都要先灭菌的.总体来说,接种就是需要无菌操作的过程.

⑩ 接种前如何做好消毒工作

银耳进入商品化生产后，栽培量大，其培养基接种大多数在无菌室内进行。为此接种场所、空间、工具等必须严格消毒，确保无杂菌污染，这里介绍几种有效消毒方法。

（1）紫外线灯消毒

用紫外线灯照射消毒，每次接种前将各种器具移入室内。一般每40米³的接种室需用2支30瓦紫外线灯，照射2小时才能达到消毒杀菌的要求。紫外线照射时，人员要离开室内，以防眼角膜、视网膜受伤。紫外线对细菌消毒较可靠，对霉菌消毒可靠性较差。因此应在培养基进房后，再次进行烟雾消毒，接着在接种前开灯照射，这样效果更好。照射结束后，隔30分钟就可开始接种。

（2）臭氧消毒

这是利用电子产生臭氧气体的强氧化作用，在接种室空间扩散，迅速渗透到杂菌的细胞壁，使其蛋白质变性，破坏酶系统，在代谢中止而被杀灭，从而净化环境。常见有南京研制的FCR-3型食用菌专用电子消毒灭菌器，电源电压185-245伏，消耗功率W＜35，机重1.5千克，外形32厘米×9厘米×9厘米。将此灭菌器挂于接种室高度2/3处，因臭氧气体比空气重，在扩散时呈下沉趋势。插上电源开机，消毒时间30～45分钟，消毒停机15～20分钟后，接种人员进房，此时臭氧已还原氧气，对人体无不良反应。

（3）喷洒安全试剂

采用石灰粉撒于接种室内或用3%～5%石灰水溶液喷洒环境消毒，或用3%～5%漂白粉溶液喷洒室内墙壁，也可以用500倍波尔多液和1%漂白粉混合液，喷洒空间四周和地面。

（4）烟雾消毒

常用气雾消毒剂或高锰酸锰与甲醛混合消毒。气雾消毒盒，按每立方米空间用量5～6克计算，一般20米²的房间，一次需要每盒50克装量的消毒盒2～3盒，点燃烟熏30分钟以上，就能达到消毒杀菌的效果。每立方米空间用40%的甲醛溶液10毫升，配7克高锰酸钾，混合进行气体消毒，也能达到无菌状态。

（5）洗刷消毒

接种室内的作业台、坐橙和接种工具等都要经过洗刷消毒，可用70%酒精擦洗工具或用3%来苏儿水溶液浸洗消毒器皿，也可用0.25%新洁尔灭溶液消毒器具。