接種前需要提前准備哪些無菌器材

① 請教無菌接種步驟

博凌科為解答：無菌接種步驟：（1）將初步洗滌及切割的材料放入燒杯，帶入超凈台上，用消毒劑滅菌，再用無菌水沖洗，最後瀝去水分，取出放置在滅過菌的紗布上或濾紙上。（2）材料吸干後，一手拿鑷子、一手拿剪刀或解剖刀，對材料進行適當的切割。如葉片切成0.5cm平方的小塊；莖切成含有一個節的小段。微莖尖要剝成只含 1-2片幼葉的莖尖大小等。在接種過程中要經常灼燒接種器械，防止交叉污染。（3）用灼燒消毒過的器械將切割好的外植體插植或放置到培養基上。具體操作過程（以試管為例）是：先解開包口紙，將試管幾乎水平拿著，使試管口靠近酒精燈火焰，並將管口在火焰上方轉動，使管口裡外灼燒數秒鍾。若用棉塞蓋口，可先在管口外面灼燒，去掉棉塞，再燒管口裡面。然後用鑷子夾取一塊切好的外植體送入試管內，輕輕插入培養基上。若是葉片直接附在培養基上，以放1-3塊為宜。至於材料放置方法除莖尖、莖段要正放（尖端向上）外，其他尚無統一要求。接種完後，將管口在火焰上再灼燒數秒種。並用棉塞，塞好後，包上包口紙，包口紙裡面也要過火

② 在微生物實驗室中無菌操作需要什麼儀器

培養皿 培養基 槍頭 移液槍 ep管 塗布器 酒精燈 等

③ 簡述無菌接種室使用前的准備工作及使用後的處理方式

對無菌接種室怎樣做好接種前的滅菌工作，湖南純臻凈化工程為您解答！
一、無菌操作環節
1、接種室應保持清潔，用煤粉酚皂液擦洗檯面及牆壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均應用紫外燈滅菌；使用過程中，採用「NICOLER」動態殺菌機，此機器在工人上班時開機、過程中持續殺菌不允許關機，工人下班後同步關機，對人體無害處的同時，時時在線滅殺空氣中的黴菌、枯草桿菌、沙門氏菌等雜菌。
2、進入接種室前，應先做好個人衛生工作，在緩沖間內要更換工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只准在接種室內使用。不準穿到其它地方去，並要定期更換、消毒。
3、接種的試管、三角並瓶等應做好標記，註明培養基、菌種的名稱、日期。移入接種室內的所有物品，均須在緩沖室用70%酒精擦試干凈。
4、接種前，雙手採用自動感應手消毒器手部消毒，建議採用75%醫用酒精作為消毒介質流程為：「感應給皂機洗手—水龍頭沖洗—感應式烘乾—感應式手消毒」；以首次殺菌後時間計算，以後每隔60-90分鍾對手部重新消毒一次，阻隔手部細菌的滋生及繁衍。
5、培養箱及接種工具應經常清潔消毒；操作過程不離開酒精燈火焰；棉塞不亂放；接種工具使用前後均需火焰滅菌。
二、 接種室的空氣消毒方法
1、紫外線消毒法，其殺菌機理是當其作用於生物體時，可導致細胞內核酸和酶發生光化學反應，而使細胞死亡。另外，紫外線還可使空氣中的氧氣產生臭氧，臭氧具有殺菌作用。
但對真菌效果差，只起輔助消毒作用，還需配合葯物使用。由於紫外線對人體有傷害作用，不要在開啟紫外燈的情況下工作。
2、臭氧發生器，能高效、快速殺滅空氣中和物體表面各種微生物，接種成功率可達97％以上；同時具有性能穩定、操作簡單、耗電小的特點。對人體有傷害作用，不要在有人的情況下工作。
3、「NICOLER動態空氣消毒機」，對車間內的空氣進行消毒，保證食品安全。該消毒技術對車間消毒時，人可同時在車間內工作，對人體沒有任何危害，同時使受控環境保持在「無菌無塵」標准。
4、甲醛和高錳酸鉀熏蒸法，使用方法是每立方米空間用8～10mL 40%甲醛和5～7g高錳酸鉀，先將高錳酸鉀倒入陶瓷或玻璃容器內，再加入甲醛；加入甲醛後人立即離開，密閉房間消毒時20～30分鍾。
三、接種室無菌程度檢查方法
取無菌的營養瓊脂平板，在接種室內台上和台下各放一套，把皿蓋打開15min，然後蓋好，倒置37℃恆溫培養24-28小時，如果每個皿內菌落不超過4個，則可以認為無菌程度良好，若菌落很多，則應對接種室進一步滅菌。
以上及「對無菌接種室怎樣做好接種前的滅菌工作」的相關資料，如有疑問可咨詢「湖南純臻凈化工程公司」。

④ 無菌接種操作應注意哪些事項

無菌接種操作時應注意以下事項：
（1）接種前要准備好一些無菌棉塞，一起放入接種箱（室）內，以便在所用棉塞受潮時更換。
（2）接種時切勿使試管口、瓶口或培養皿開縫處離開酒精燈火焰的無菌區（火焰周圍8～10厘米），但要注意不要燒傷菌種。
（3）接種時試管口、瓶口一般不向上，以減少雜菌污染機會。
（4）接種時人在室內盡量少走動，以減少空氣流動揚起的灰塵污染。同時，應全部接種完待接種物後方可離開現場。
（5）接種時留下的火柴梗、菌種碎屑、用過的酒精棉球等雜物要及時清除，以免引起污染。
（6）如一次接種不同菌種時，要注意做好標記，以免使菌種混雜。

⑤ 請講述無菌操作接種的全過程。

培養基經高壓滅菌後，用經過滅菌的工具（如接種針和吸管等）在無菌條件下接種含菌材料（如樣品、菌苔或菌懸液等）於培養基上，這個過程叫做無菌接種操作。在實驗室檢驗中的各種接種必須是無菌操作。

實驗檯面不論是什麼材料，一律要求光滑、水平。光滑是便於用消毒劑擦洗；水平是倒瓊脂培養基時利於培養皿內平板的厚度保持一致。在實驗台上方，空氣流動應緩慢，雜菌應盡量減少，其周圍雜菌也應越少越好。為此，必須清掃室內，關閉實驗室的門窗，並用消毒劑進行空氣消毒處理，盡可能地減少雜菌的數量。

空氣中的雜菌在氣流小的情況下，隨著灰塵落下，所以接種時，打開培養皿的時間應盡量短。用於接種的器具必須經乾熱或火焰等滅菌。接種環的火焰滅菌方法：通常接種環在火焰上充分燒紅（接種柄，一邊轉動一邊慢慢地來回通過火焰三次），冷卻，先接觸一下培養基，待接種環冷卻到室溫後，方可用它來挑取含菌材料或菌體，迅速地接種到新的培養基上。（圖3－4）然後，將接種環從柄部至環端逐漸通過火焰滅菌，復原。不要直接燒環，以免殘留在接種環上的菌體爆濺而污染空間。平板接種時，通常把平板的面傾斜，把培養皿的蓋打開一小部分進行接種。在向培養皿內倒培養基或接種時，試管口或瓶壁外面不要接觸底皿邊，試管或瓶口應傾斜一下在火焰上通過。

⑥ 何謂無菌操作接種前應作哪些准備工作

無菌操作就是要求操作環境為無菌環境。例如在無菌室、超凈工作台或酒精燈火焰10cm內都可視為為無菌環境；
在進行接種時不嚴格無菌操作就極有被環境微生物污染的可能，導致培養物出現雜菌，嚴重影響實驗或生產。

⑦ "請闡述微生物接種時,無菌操作應該從哪些方面入手

微生物接種的時候進行無菌操作的時候應該在無菌，操作台也就是超凈工作台上操作。同時手上還有一些相關的該消毒就要消毒。接觸到的物品要用酒精燃燒或者其他方式進行滅菌。

⑧ 無菌操作要注意什麼

無菌操作，是指在無菌室或超凈台中進行以防止微生物進入人體或污染供試菌的操作技術，注意事項有：

1、環境要清潔

進行無菌操作前半小時，須停止清掃地面等工作。避免不必要的人群流動，防止塵埃飛揚。治療室應每天用紫外線消毒一次。

2、明確情節區域

在執行無菌操作時，必須明確物品的無菌區和非無菌區。

3、確保准備工作

執行無菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，並將手擦乾，注意空氣和環境清潔。

4、夾取無菌物品

必須使用無菌持物鉗。 進行無菌操作時，凡未經消毒的手、臂、均不可直接接觸無菌物品或超過無菌區取物。

無菌操作的技巧：

新購玻璃器皿應先用熱肥皂水沖洗，再用自來水沖洗，再用1%-2%鹽酸溶液浸泡除去游離鹼，再用清水沖洗。對於試劑瓶、燒瓶或量具等容量較大的容器，用清水沖洗後，應注入少量濃鹽酸，緩慢旋轉，使鹽酸覆蓋容器內壁。幾分鍾後，應倒出鹽酸，然後用水沖洗。

硝酸清洗液可製成50%的水溶液，用於微量滴定筒的清洗。用EDTA鈉鹽在5%～10%的水溶液中洗脫附著在玻璃器皿內壁上的白色沉澱物。尿素溶液尿素是溶解蛋白質的良好溶劑。適用於血液、血清等蛋白質清洗吸管和試管。

以上內容參考：網路—無菌操作

⑨ 培養基的製作至接種,哪些步驟要無菌操作

培養基製作好了以後要滅菌待用,接種的話,在超凈工作台進行無菌操作,跟接種有關的東西都要先滅菌的.總體來說,接種就是需要無菌操作的過程.

⑩ 接種前如何做好消毒工作

銀耳進入商品化生產後，栽培量大，其培養基接種大多數在無菌室內進行。為此接種場所、空間、工具等必須嚴格消毒，確保無雜菌污染，這里介紹幾種有效消毒方法。

（1）紫外線燈消毒

用紫外線燈照射消毒，每次接種前將各種器具移入室內。一般每40米³的接種室需用2支30瓦紫外線燈，照射2小時才能達到消毒殺菌的要求。紫外線照射時，人員要離開室內，以防眼角膜、視網膜受傷。紫外線對細菌消毒較可靠，對黴菌消毒可靠性較差。因此應在培養基進房後，再次進行煙霧消毒，接著在接種前開燈照射，這樣效果更好。照射結束後，隔30分鍾就可開始接種。

（2）臭氧消毒

這是利用電子產生臭氧氣體的強氧化作用，在接種室空間擴散，迅速滲透到雜菌的細胞壁，使其蛋白質變性，破壞酶系統，在代謝中止而被殺滅，從而凈化環境。常見有南京研製的FCR-3型食用菌專用電子消毒滅菌器，電源電壓185-245伏，消耗功率W＜35，機重1.5千克，外形32厘米×9厘米×9厘米。將此滅菌器掛於接種室高度2/3處，因臭氧氣體比空氣重，在擴散時呈下沉趨勢。插上電源開機，消毒時間30～45分鍾，消毒停機15～20分鍾後，接種人員進房，此時臭氧已還原氧氣，對人體無不良反應。

（3）噴灑安全試劑

採用石灰粉撒於接種室內或用3%～5%石灰水溶液噴灑環境消毒，或用3%～5%漂白粉溶液噴灑室內牆壁，也可以用500倍波爾多液和1%漂白粉混合液，噴灑空間四周和地面。

（4）煙霧消毒

常用氣霧消毒劑或高錳酸錳與甲醛混合消毒。氣霧消毒盒，按每立方米空間用量5～6克計算，一般20米²的房間，一次需要每盒50克裝量的消毒盒2～3盒，點燃煙熏30分鍾以上，就能達到消毒殺菌的效果。每立方米空間用40%的甲醛溶液10毫升，配7克高錳酸鉀，混合進行氣體消毒，也能達到無菌狀態。

（5）洗刷消毒

接種室內的作業台、坐橙和接種工具等都要經過洗刷消毒，可用70%酒精擦洗工具或用3%來蘇兒水溶液浸洗消毒器皿，也可用0.25%新潔爾滅溶液消毒器具。