A. dna親子鑒定都需要哪些設備
2.2.1 試劑貯存和准備區 -20℃冰箱 紫外線燈 消耗品:一次性手套、一次性吸水紙 專用工作服和工作鞋 專用辦公用品 微量加樣器 2.2.2 標本制備區 冷藏、貯存兩用電冰箱 台式高速離心機 混勻器 微型加熱模塊 微量加樣器 紫外線燈 消耗品:一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭 專用工作...服和工作鞋 專用辦公用品 2.2.3 擴增反應混合物配製和擴增區 微量加樣器 紫外線燈 消耗品:一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭 二級生物安全櫃 電冰箱 混勻器 台式高速離心機 專用工作服和工作鞋 專用辦公用品 2.2.4 擴增產物分析區 FQD-33A熒光定量擴增儀 穩壓器 紫外線燈 消耗品:一次性手套 專用工作服和工作鞋 專用辦公用品 計算機 核子基因親子鑒定 ——專業 准確 權威
B. DNA提取過程中所用到的主要設備有哪些他們各自使用的注意事項是什麼
一:人體DNA的簡易提取法
★所需的材料:①一茶匙鹽,放進一杯水(自來水即可,絕對不能有雜質)里完全溶解、②一個干凈的小玻璃杯、③一些洗滌液(去超市買正規的)、④一根滴管(可在化學品試劑店買)、⑤酒精度在50°以上的冰鎮烈性酒(桶釀燕麥威士忌、質量上乘的杜松子酒、高度伏特加酒,或者抗菌酒精都能實現這項工作) ★製取方法:在干凈的小玻璃杯里放入一茶匙洗滌液並用三茶匙水(自來水即可,絕對不能有雜質)稀釋。用鹽水在嘴裡用力漱洗30秒鍾左右,然後吐進稀釋的洗滌液之中。用力攪拌混合物幾分鍾,然後非常小心地把兩茶匙冰鎮烈酒順著玻璃杯的側壁倒進去。如果你的手不能拿穩,可以使用滴管,把杯子稍微傾斜一下會對此有所幫助。這個步驟要求注意力非常集中,而且是非常關鍵的一步,必須要形成一個涇渭分明的水和酒之間的界限。如果你做到了細心謹慎,就將在鹽和漱口水混合液的頂部形成單獨的一層;等幾分鍾之後,你就會看到在酒之中開始形成紡錘形、白色、線狀的團塊樣物質。這就是你的DNA。接下來如果有條件的話,可用1280倍的顯微鏡觀察…… ★注意事項:在開始之前,一定要保證你的口腔是干凈的。如果剛吃完東西,要等4個多小時後才能提取,以確保提取的精度。
二:動物DNA的簡易提取法
(略為復雜一些) ★所需的材料:①雞血細胞液5~10毫升(後面有雞血細胞液的製作方法)、②鐵架台、③鐵環、④鑷子、⑤三角架、⑥酒精燈、⑦石棉網、⑧載玻片(可在化學品試劑店買)、⑨玻璃棒、⑩濾紙、⑾滴管(化學品試劑店買)、⑿量筒(100ml一個)、⒀燒杯(100ml一個,50ml和500ml各2個)、⒁試管(20ml2個)、⒂漏斗(建議買3個)、⒃試管夾(建議買4個)、⒄紗布(建議買4個)、⒅體積分數為95%的酒精溶液(就是濃度為95%的酒精,實驗前置於冰箱內冷卻24小時,建議冷藏室的溫度調節在4°~6°之間最好)、⒆蒸餾水(不少於500毫升)、⒇質量濃度為0.1%克/ml(毫升)的檸檬酸鈉溶液、(21)物質的量濃度為2mol(摩爾)/L(升)和0.015mol/L的氯化鈉溶液、(22)二苯胺試劑(本試劑是成瓶的)。 ★製取方法:①制備雞血細胞→取剛殺過的雞血(要干凈,不能有雜質)50毫升左右,加入檸檬酸鈉防止凝血;除去上面的清液,因為DNA主要存在於細胞核中。②提取核物質→加蒸餾水(一般是雞血細胞的2倍半)並用玻璃棒攪拌不少於5分鍾,使血細胞破裂,釋放出的DNA往往和蛋白質結合在一起。③溶解核內DNA→DNA在高濃度的氯化鈉溶液中溶解度很高,用2mol/L的氯化鈉溶液可以加速核蛋白解聚,游離出DNA。④析出含DNA的粘稠物→加蒸餾水降低氯化鈉溶液的濃度至0.14mol/L,此時DNA的溶解度下降,蛋白質的溶解度增高,從而使DNA和蛋白質分離,析出DNA(注意:此步驟要精確濃度)。⑤濾出含DNA的粘稠物→用紗布過濾得到絲狀DNA的粘稠物。⑥DNA粘稠物再溶解→加入2mol/L的氯化鈉溶液後,充分攪拌,使DNA溶解。⑦過濾含DNA的氯化鈉溶液→用新紗布過濾。⑧提取較純凈的DNA→加入冷卻的濃度為95%的酒精,使DNA沉澱、濃縮、形成含雜質較少的白色絲狀物。⑨DNA的鑒定→DNA的鑒定可用二苯胺法,DNA遇到二苯胺變為藍色;還可以用「甲基綠」法,「甲基綠」使DNA變為藍綠色。 ★注意事項:①盛放雞血細胞的容器,最好是塑料容器。雞血細胞破碎後,DNA容易被玻璃容器吸附。因此,實驗中最好使用塑料的燒杯和試管,可以減少提取過程中DNA的損失。②實驗中攪拌含有懸浮物的溶液時,玻璃棒不要直插燒杯底部,同時攪拌要輕慢。③用「甲基綠」法鑒別DNA時,可將「甲基綠」直接滴到玻璃棒的絲狀物上後,要用水充分沖洗掉浮色後再觀察。
三:植物DNA的簡易提取法
(提取時千萬要注意裡面的步驟!!!) ★所需的材料:①新鮮菜花(或蒜黃、菠菜)。②塑料燒杯一個。③量筒(規格和數量同上)。④玻璃棒一個。⑤尼龍紗布(數量同上)。⑥陶瓷研缽一個(最好用陶瓷的)。⑦試管(數量同上,沒標明數量的要同時准備兩個,以備用)。⑧試管架(數量同上)⑨試管夾(數量同上)。⑩漏斗(數量同上)。⑾酒精燈一個。⑿石棉網(數量同上)。⒀三角架。⒁火柴一把(小火柴)。⒂刀片一把(小刀即可)。⒃天平。⒄研磨液(可在化學品試劑店買)。⒅體積為95%的酒精溶液(體積就是濃度)。⒆二苯胺試劑一瓶。⒇蒸餾水(不少於500毫升)。(21)塑料離心機一台(也可用食品加工機代替)。 ★製取方法:①准備材料→將新鮮菜花和濃度為95%的酒精溶液放入冰箱冷凍室內,至少24個小時,建議48個小時,冷凍室的溫度要調成-18°以下。②取材→稱取30克菜花,去梗取花,切碎。③研磨→將碎菜花放入研缽內,倒入10毫升研磨液,充分研磨10分鍾,建議15分鍾。④過濾→在漏斗中墊上尼龍紗布,將菜花研磨液濾入燒杯中(有條件的可將濾液濾入塑料離心機中離心,用1000轉/分鍾的速度旋轉,離心5分鍾,取出上面的清澈液體放入燒杯中。[也可用食品加工機代替,但速度一定要有保證!])在4°的冷藏室中放置5~6分鍾後,再取上面的清澈液體。⑤加冷酒精→將一倍體積的清澈液體倒入兩倍體積濃度為95%的冷酒精中,並用玻璃棒緩緩地輕輕地攪拌溶液(玻璃棒不要插入燒杯底部)。沉澱3~5分鍾後,可見白色的DNA絮狀物出現。用玻璃棒緩緩旋轉,絮狀物會纏在玻璃棒上。⑥配製二苯胺試劑→取0.1毫升B液,滴入到10毫升A液中,混勻。⑦鑒定→取4毫升DNA提取液放入試管中,加入4毫升二苯胺試劑,混勻後觀察溶液顏色(不變藍)。用沸水浴(100°)加熱10分鍾。在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色)。 ★注意事項:①一定的冷凍時間是絕對要掌握好的,因為植物的DNA提取不易。②研磨的時間也要掌握好,理由同前。③要想好一切步驟,一舉呵成,就是要抓緊時間,理由同前。
C. DNA鑒定需要什麼
您好,很高興幫您解答!親子鑒定可以分為司法鑒定和個人鑒定。司法鑒定是專指必由相關機構出具委託書屬,經過一系列司法公正程序所完成的鑒定,具有法律效力,可作為法庭證據使用。個人鑒定僅是對個人的遺傳基因所做的生物學比對,鑒定流程相對簡單,但不能作為法庭證據使用。私人鑒定只需要採集標本(口腔細胞、毛發、血液等),交納鑒定費用即可。
到正規醫療機構鑒定,不要輕信廣告。
D. 做DNA親子鑒定都需要准備些什麼東西
DNA親子鑒定分個人親子鑒定和司法親子鑒定: 個人親子鑒定:只需提供要鑒定人的樣本,如父子或母子雙發的血樣或毛發等(為了自己心中有數)。 司法親子鑒定:是為提供法律證據的,除了要提供鑒定的樣本外,還需要提供身份證等及司法部門要求的文件等。 (註:)想了解更多請瀏覽湖南省中瑞司法鑒定中心網站,網路搜索:湖南省中瑞司法鑒定中心即可。 希望以上信息會對你有所幫助!
E. 做dna檢測鑒定需要哪些准備
如果是個人隱私親子鑒定類型,可以直接郵寄資料及樣本到佛山康瑞基因進行dna檢測就可以了,司法鑒定類型則需要本人攜帶身份證、戶口本等原件前往鑒定機構了。
F. DNA鑒定,需要什麼手續和多少費用
一、DNA鑒定手續/流程
1、匿名鑒定流程
(1)客戶通過電話、在線客服向鑒定單位咨詢預約;
(2)客戶自行采樣,或預約采樣員上門采樣,或前往采樣點接受免費采樣;
(3)由專業人員驗看客戶提供的樣本;
(4)付款繳費;
(5)鑒定人檢測樣本;
(6)五至七個工作日出報告。
2、常規鑒定流程
(1)客戶通過電話、在線客服向鑒定單位咨詢預約;
(2)孕婦由專業人員陪同至正規三甲醫院進行胎兒羊水或絨毛的采樣。胎兒父母的樣本可自行采樣,或預約采樣員上門采樣,或前往采樣點接受免費采樣;
(3)由專業人員驗看客戶提供的樣本;
(4)付款繳費;
(5)鑒定人檢測樣本;
(6)五至七個工作日出報告。
3、無創胎兒鑒定流程
(1)客戶通過電話、在線客服向鑒定單位咨詢預約;
(2)預約采樣員上門采樣,或前往采樣點接受免費采樣;
(3)付款繳費;
(4)鑒定人員檢測樣本;
(5)十到十五個工作日出結果。
4、 落戶口親子鑒定流程
(1)客戶通過電話、在線客服向鑒定單位咨詢預約;
(2)客戶預約采樣員上門采樣,或前往采樣點接受免費采樣。采樣前由采樣員核對身份信息。
(3)由專業人員驗看客戶提供的樣本;
(4)付款繳費;
(5)鑒定人檢測樣本;
(6)五至七個工作日出報告。
5、司法親子鑒定流程
(1)客戶通過電話、在線客服向鑒定單位咨詢預約;
(2)被鑒定人攜帶有效身份證件親自到鑒定單位
(3)工作人員核對被鑒定人身份信息並留取復印件;
(4)工作人員對證件和被鑒定人分別拍照;
(5)由專業人員採集樣本;
(6)付款繳費;
(7)工作人員立即將樣本送往實驗室檢測;
(8)五至七個工作日出報告。
二、費用
1、個人親子鑒定常規樣本(血痕、口腔粘膜)鑒定費用為800元/樣本,毛發親子鑒定費用為1000元/樣本。特殊樣本(口香糖、混合斑、經血、指甲、煙頭、純精斑、胎兒流產物、臍帶血、牙刷、牙齒、病理組織、切片、臍帶血等)檢測難易程度不一,收費也略有差異。
2、落戶/訴訟/移民等司法親子鑒定 1000元起/樣本
3、孕期無創親子鑒定約六到七千元/例
DNA親子鑒定原理:
一個人有23對(46條)染色體,同一對染色體同一位置上的一對基因稱為等位基因,一般一個來自父親,一個來自母親。如果檢測到某個DNA位點的等位基因,一個與母親相同,另一個就應與父親相同,否則就存在疑問了。司法親子鑒定中心利用DNA進行親子鑒定,只要作十幾至幾十個DNA位點作檢測,如果全部一樣,就可以確定親子關系,如果有3個以上的位點不同,則可排除親子關系,有一兩個位點不同,則應考慮基因突變的可能,加做一些位點的檢測進行辨別。DNA親子鑒定,否定親子關系的准確率幾近100%,肯定親子關系的准確率可達到99.99%。
G. DNA提取過程中所用到的主要設備有哪些
DNA提取過程中所用到的主要設備有哪些
DNA的粗提取
①准備材料 將新鮮菜花和體積分數為95%的酒精溶液放入冰箱冷凍室,至少24 h。
②取材 稱取30 g菜花,去梗取花,切碎。
③研磨 將碎菜花放入研缽中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min 。
④過濾 在漏斗中墊上尼龍紗布,將菜花研磨液濾入燒杯中(有條件的學校可將濾液倒入塑料離心管中進行離心,用1 000r/min的旋轉頻率,離心25 min,取上清液放入燒杯中)。在4 ℃冰箱中放置幾分後,再取上清液。
⑤加冷酒精 將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的體積分數為95%的冷酒精溶液中,並用玻璃棒緩緩地輕輕攪拌溶液(玻璃棒不要直插燒杯底部)。沉澱35 min後,可見白色的DNA絮狀物出現。用玻璃棒緩緩旋轉,絮狀物會纏在玻璃棒上。
(2)DNA的鑒定
①配製二苯胺試劑 取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混勻。
②鑒定 取4 mL DNA提取液放入試管中,加入4 mL 二苯胺試劑,混勻後觀察溶液顏色(不變藍)。用沸水浴(100 ℃)加熱10 min 。在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色)。
研磨液的配製方法
Tris:10.1 g(相對分子質量為121.14),先加50 mL 蒸餾水溶解,用物質的量濃度為2 moL/L 的鹽酸調至pH8.0,再加下述葯品。
NaCl:8.76 g(相對分子質量58.44)
EDTA:37.2 g(相對分子質量372.24)
SDS:20 g(相對分子質量288.3)
待上述葯品全部溶解後,再用蒸餾水定容至1 000 mL。
若在室溫低於20 ℃時配製葯液,SDS呈沉澱析出,此時需要加溫,才能將SDS溶解。如果提前配製的研磨液出現了沉澱,則應加溫使沉澱溶解後再使用。
研磨液中幾種葯品的作用
SDS(十二烷基磺酸鈉):可使蛋白質變性,與DNA分離。
EDTA(乙二胺四乙酸二鈉):為DNA酶的抑制劑,可以防止細胞破碎後DNA酶降解DNA。
物質的量濃度為0.15 moL/L的氯化鈉溶液:能很好地溶解DNA。
Tris/HCl:提供緩沖體系,DNA在這個緩沖體系中呈穩定狀態。(Tris為三羥甲基氨基甲烷)
鑒定DNA的其他方法 用紫外燈照射法鑒定DNA效果很好。具體鑒定方法如下。
1.配製染色劑。用蒸餾水配製萬分之五的溴化乙錠(EB)溶液。
2.將玻璃棒上纏繞的白色絮狀物抹於蠟紙上,再滴1滴EB溶液染色。
3.將蠟紙放在紫外燈(260 nm)下照射(暗室中),可見橙紅色的螢光(DNA的紫外吸收高峰在280 nm處)。