流式細胞檢測用什麼設備

① 流式細胞儀的原理是什麼

最近一直在了解流式細胞術和流式分選的知識，看到這個問題想回答一下：

流式細胞儀是以流式細胞術為基礎，快速精確的對單個細胞的理化性質進行定量分析和分選。分析流程為：制備單細胞懸液，用特異性熒光染料標記的抗體進行染色，經染色後的待測細胞在一定氣體壓力下被壓入流動室，在鞘液的包裹下細胞呈單行排列，依次通過檢測區域，在激光束的照射下細胞會產生散射光和激發熒光。這兩種信號會同時被光電倍增管( PMT) 接收。接收後可轉換為電信號，通過模/數轉換器，將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號，進行分析。

如上所述，流式細胞儀是由液流系統、光路系統以及檢測分析系統三部分組成，部分儀器還具有分選功能，能對粒子進行充電和偏轉從而實現細胞分選。

1. 液流系統：通過產生壓力使含有目的細胞的樣本快速進入儀器，在封閉的樣品管中利用樣品和鞘液之間的壓力差是樣本聚集到光學分析系統；

2. 光路系統：由不同的激光器發射出的激光照射到細胞表面產生光信號，而後經過不同的光路系統被接收。在流式照射室的分析點，激光照射到細胞表面發生散射和折射，並發射出散射光包括前向散射光（FSC）和側向散射光（SSC）,同時細胞表面的熒光素被激發發射出熒光。前向散射光和側向散射光檢測器收集散射光轉變為電信號；熒光則被聚光器收集，不同顏色的熒光被雙色反光鏡轉向不同的光電倍增檢測器，將熒光信號也轉變成電信號。FSC和SSC是流式分析中兩個非常基本的參數。FSC的值能代表細胞的大小，細胞的體積越大則FSC就越大。SSC則代表細胞的顆粒度，細胞內細胞器和顆粒度越大則SSC越大。

3. 檢測分析系統：熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原強度或細胞內物質的濃度，光信號轉換為可被計算機識別的電信號。計算機把所測量的各種信號進行處理分析。

4. 流式細胞分選是在流式細胞術的基礎上進行的。在流動室的噴口上方配有一個超高頻的壓電晶體，產生的振動使噴出的液流形成均勻的液滴，待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷（對標有熒光素的細胞液滴帶以負電荷；未標記熒光素的細胞液滴帶以正電荷；而不含有細胞的液滴則不被帶電荷），當液滴流經偏轉板時，在高壓電場的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，不帶電荷的液滴落入廢液容器，從而實現細胞的分離。

   第一次回答希望能幫到你，如有理解不當的地方，歡迎指正！

② 如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS

流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說，針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到版細胞培養液後，細權胞攝齲遇到ROS，可以發出熒光，上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度，縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用了氧化敏感的熒光指針，ROS反應後熒光增加。所以你應該先用對照組設一個閾值，看實驗組的熒光強度有沒有高於或者低於該閾值。

③ 哪些流式細胞儀採用pmt檢測器

市場上絕大多數的主流儀器，比如常見的BD LSR II， BD Aria都是採用PMT的

④ 細胞檢測為什麼要用流式細胞檢測技術

和其他技術相比，流式的特點如下：
可以一次在很短時間內檢測版大量的細胞數目權，比如在數分鍾內記錄分析數百萬的細胞。每個細胞都可以是多熒光染色的。根據機器的配置不同，可以同時分析20種左右的指標。特點總結為簡單的詞就是，快，多。
流式不光能檢測細胞，凡是大小和細胞相仿的顆粒，都可以檢測。所以現在還發明了以微球為基礎的溶液細胞因子檢測，一次可以檢測數十種的細胞因子濃度。

⑤ 流式細胞分析儀 什麼牌子好

現在流式細胞儀的廠家很多。沒有啥最好一說，而是根據你的需求，能回滿足你需求和有能負答擔得起的就是最好的。

開口就說啥牌子貴，啥牌子好是不負責任的廣告。

具體考慮一下幾個因素：多少個激光，多少個通道。即使型號相同的機器，配置了不同的激光，價格也相差很多。還有就是激光的功率，和光路的幾何形狀，功率越大，光路直徑越小，解析度就越高。第二是運行的成本。大部分的機器是靠鞘液來帶樣本的，需要隨時添加。有些可以採集微量樣本。有些是注射器形式吸取樣本，同時可以定量。

還要考慮的就是維護成本，包括日常配件，或者日後保修合同的價格等等。

目前市場上，除了常見的BD， beckman, Millipore, Life technology等國際大型公司的產品，還有一些小公司的產品也很有特色。

總之要看你購機的需求是啥。

我在美國從事流式細胞儀工作很多年了。你有啥需求，我可以給你專業建議。

⑥ 流式細胞儀在實驗室主要用於哪些檢測

流式可以檢測的樣本很多：
細胞表面的蛋白，通過熒光抗體直接標記
細胞內回部的蛋白，細胞固定，答通透後再用熒光抗體識別
細胞內部的DNA含量，細胞固定，通透後加DNA染料
細胞內部鈣離子濃度，直接加鈣離子濃度熒光染料染色
細胞內部線粒體膜電位，比如JC-1，羅丹明染料
使用微球陣列，可以同時檢測溶液中數十種可溶性蛋白的濃度

⑦ 流式細胞儀檢測需要哪些試劑耗材

耗材：

1. 流式的試管

2. 細胞濾網

3. 加樣的吸管槍頭

試劑：

1. 染色的各種染料，標記好的熒光抗體

2. 染色所需要的緩沖液，封閉液，PBS

3. 最終由於上樣的緩沖液
   

⑧ 用流式細胞儀檢測CD4 CD8 怎麼做啊 准備什麼

這個是T細胞表面標記。

所以要准備好：

1. 被測樣本的單細胞懸液。可以是去紅細胞的血細胞，分離的淋巴結或者脾臟的細胞

2. 准備4個管子，分別為無染色，單染CD3， 單染CD4和單染CD8，每管至少准備10-20萬細胞。用來設置機器和compensation

3. 同樣的方法，用三種抗體同時染樣本

4. 分析結果。
   
   典型的結果一般和下圖類似

⑨ 流式細胞術的原理在哪些檢驗儀器或技術平台中還有應用

血細胞分析儀和尿沉渣分析儀都有應用，可以形成連續的單細胞液柱，對每一個細胞逐個分析

⑩ 如何用流式細胞儀檢測GFP的表達

流式細胞儀原理簡單來講就是將細胞包裹在細細的液流中，將細胞以一個專一個的形式通過激光，GFP本身屬屬於綠色熒光蛋白，受到488左右的激光激發會釋放出熒光，通過檢測側向散射的熒光強度經過信號放大可以得到樣品的熒光情況。
具體的操作根據設備的不同都有不同，建議直接查看儀器的操作手冊，但基本原理都是相同的，需要先將要鑒定的細胞消化、過濾網去除大塊雜質，然後細胞懸液經由上樣管進入流式分析儀或分選儀。第一次鑒定的話，需要准備陰性及陽性的對照，即不表達GFP的同種細胞，用該細胞設門，再上帶有GFP的細胞，檢測未知樣品時，用FITC或相對應的通道的信號強度，去除陰性的門就是陽性的細胞亞群了。