A. 如何選購適合自己使用的移液器
移液器的選擇與很多因素有關,大概可以分類如下:一,移液器的因素,如精度、量程、材質、設計和價格等,最近幾年人體工程學的概念也進入了人們的視線;二,供應商的因素,如合作關系和服務等;三,使用者的因素,如使用習慣和應用領域等。後文我們將一一展開。
移液器的選擇(二)精度
鄙人所說的移液器的精度,是指准確性和重復性。對此,各品牌的表述並不一致,有的說是准確度和精確度,有的說是系統誤差和偶然誤差。但既然是我自己寫的東東,就不管別人是怎麼說的,總是以自己的為准。
所謂准確性,是指測定值與真實值(設定值)符合的程度,也就是測量值與真實值的差距大小,而在實際計算時,我們往往把設定值作為真實值(對於絕大多數移液器,其最大的量程的准確性一般在±1%左右);所謂重復性,是指單次測定值與平均值符合的程度。至於具體的計算方法,對於使用者而言用處不大,我也將在以後討論「移液器的校準」時進一步展開。
對於絕大多數用戶而言,購買之前檢測產品的精度既有難度又無必要。因此,主要還是依據製造廠商提供的技術數據。但在這里還是要說明一點:不要輕易相信供應商的口頭承諾,一定要查閱製造商的宣傳手冊。當然,雖各品牌的移液器在其宣傳手冊上都會有相關的精度數據,但這些數據的來源,卻差距很大。首先說,原始數據的產生都是相同的:隨機選取一定數量的同型號移液器,分別取三個量程點(一般是移液器的最大量程、50%量程和10%量程),重復一定次數測量後計算出每支移液器的精度值;其次說,數據篩選的原則不盡相同:比較謹慎的品牌會選精度最低的某支移液器的數據作為其宣傳手冊上的數據,還算規矩的品牌會選各支移液器精度的平均值,而個別滑頭的品牌會選精度較好甚至最好的某支移液器的數據!所以,「白紙黑字」未必總是可信的,還是需要我們有雙能辨明真偽的眼睛。
一般說來,以下兩點對我們認清宣傳手冊上的精度數據有所幫助:其一,製造商的中文版手冊上的精度數據應該與其英文版完全一致,如不一致,就有「作弊」的嫌疑;其二,在全球移液器市場上影響較大的品牌,其提供的技術數據可信度更高。
還有一點不得不提,國內有相關的計量檢定標准(中華人民共和國國家計量檢定規程JJG 646-2006 :移液器),該文件對國家的精度標准作了詳細的闡述。對於該文件,我想說明其兩點不足之處:一,其小量程移液器的精度要求過低,目前市場上的各品牌的出廠標准均遠高於該國家標准;二,其大量程移液器(1000ul及以上)的10%量程點的精度要求過高,目前沒有一個品牌的出廠數據能達到其標准。
移液器的選擇(三)量程
對於可調量程單道移液器,目前常見的量程范圍有0.1-2ul、1-10ul、2-20ul、5-50ul、10-100ul、20-200ul、30-300ul、100-1000ul、500-5000ul、1-10ml和2-20ml;對於可調量程多道移液器,目前常見的量程范圍有1-10ul、2-20ul、5-50ul、10-100ul、20-200ul、30-300ul和100-1200ul。可以說,沒有一個品牌的產品可以完全涵蓋以上量程。
對於量程,我想可以從以下幾個方面來理解:
第一,移液器的量程范圍一般是其最大量程到其最大量程的10%。如果您需要某一個量程范圍的移液器,您只要說出其最大量程即可,一般情況下供應商都能明白您的意思。舉例而言,如果您說到200ul的移液器,一般意味著這支移液器的量程范圍是20-200ul。當然,少數移液器標稱的最小量程是其最大量程的5%甚至更小,這多數是個「噱頭」,實際用處一般不大。
第二,對於同一支移液器,一般隨著其移液量的變小,其精度也越來越小。一般說來,當移液量為最大量程的50%時,其精度比最大量程時略小,但變化不大;當移液量為最大量程的10%時,其精度與最大量程時相比會差很多。不妨舉個例子,對於最大量程為20ul、200ul和1000ul的移液器,當在最大量程點使用時,准確性(±%)一般都在1左右,重復性(≤%)一般是0.1-0.3;而當在10%量程點使用時,准確性(±%)一般是3-8,重復性(≤%)一般是0.5-2。
第三,一支移液器的最佳使用量程范圍是其最大量程到其最大量程的1/3左右。如果您對精度有一定的要求,一般不建議在最大量程的1/3到最小量程范圍內使用移液器。再舉個例子。如果您有兩支移液器,量程范圍分別是1-10ul和10-100ul,這並不意味著您可以用這兩支移液器實現在1-100ul范圍內的准確移液器,您可以准確移液的范圍只有3-10ul和33-100ul;如果您想實現在1-100ul范圍內的准確移液,在最理想的情況下恐怕您需要6支移液器,其量程范圍分別是0.1-2ul、0.5-5ul、1-10ul、2-20ul、5-50ul和10-100ul(當然,目前還沒有什麼品牌可以完整的提供這個組合,只能是盡量做到合理搭配)。
移液器的選擇(四)計量檢定規程
中華人民共和國國家計量檢定規程JJG 646-2006 :移液器
移液器的選擇(五)材質
移液器的精度和壽命如何,與移液器的材質緊密相關。
移液器一般由數十個部件組成,而這些部件的功能不同,對材質特點的要求也不同,材質也就不可能完全相同了。但總體上,還是有些許規律的:其一,多數是塑料部件。畢竟塑料容易加工、重量輕,成本也相對低廉;其二,所有部件都需要有一定的熱穩定性。
對於製造商而言,移液器各部件的材質基本不會對外公開的,本人手頭的資料也是少的可憐;對於使用者而言,也只能關注幾個容易了解且比較重要的部件:
一.槍體(手握持的部分)。比較容易理解的是這一部分需要耐腐蝕、耐磨損,而容易被忽視的是這一部分需要很低的熱傳導性:如果手握持移液器的時間較長,有可能通過槍體把手溫傳導到內部的部件上,造成這些部件的變形,從而影響移液器的精度。這個部件目前基本上都是用塑料,其中比較好的是PVDF(聚偏氟乙烯);
二.套柄(或稱套筒,指移液器的下半部分,一般為白色塑料)。除了耐腐蝕外,還需要:其一,耐磨損。套柄的下端需要不斷與吸頭發生摩擦;其二,耐沖擊。在國內,由於大多數情況下用質量較差的吸頭,在裝吸頭時需要用較大的力。為了解決這兩個問題,有的品牌在其套柄的下端甚至整個套柄使用了金屬材質;有的品牌則在設計上下功夫,減少套柄與吸頭的摩擦並減少裝吸頭的用力,這樣對套柄材質的要求就降低了;
三.活塞(位於移液器下半部分的套柄內)。目前最常用的材質有兩種:一是不銹鋼。不銹鋼的機械加工性能較好,容易實現密封,並且強度高,不易變形,能保證非常高的精度,是高端移液器的普遍選擇。但不銹鋼也有缺點,那就是耐腐蝕性較差。因此,不銹鋼活塞對日常的使用和保養要求較高;二是塑料。塑料容易成型且成本低廉,低端移液器上使用比較普遍。同時,塑料也有很大的缺點,就是容易變形,很難保持較高的密封性,從而降低了移液器的精度。除了以上兩種,市場上還有一些特殊的材質:一是陶瓷(代表品牌是EPPENDORF,其中間量程移液器的活塞為陶瓷材質)。陶瓷的突出特點是耐腐蝕,但加工較困難,活塞表面無法做到象不銹鋼那樣平滑,因此要保持密封離不開潤滑劑的幫助。並且,如果用作小量程移液器的活塞,由於直徑過小,機械強度會較差(所以EPPENDORF的小量程移液器的活塞還是選用不銹鋼);二是玻璃(代表品牌是BRAND)。玻璃耐腐蝕且表面平滑,但表面不耐磨,容易出現劃痕,且損壞後極難修復。總體上來說,不銹鋼活塞的精度最高,塑料活塞的最低;
四.密封圈(安裝於活塞上)。因為密封圈可能會受到各種化學介質的「攻擊」,且對密封性的影響很大,需要保持較長的青春,所以最好是用PTFE(聚四氟乙烯)等耐腐蝕、不易變形的材質。
移液器的選擇(六)設計
現在,搞設計的越來越吃香,有的產品甚至已經到了「唯設計論」的地步。同樣,移液器也不例外,一個好的設計對增加使用舒適度、提高移液精度和延長使用壽命都會有明顯的幫助。下面,我們就揀幾個比較重要的地方討論一下。
吸/排液按鈕與退吸頭按鈕。最初,這兩個按鈕是一體的。一個按鈕有三個停止點,到第一個停止點為吸液,到第二個停止點為排液,到第三個停止點為退吸頭。但在實際操作中,容易把這三個停止點混淆,從而造成操作錯誤。1978年,GILSON第一個讓這兩個按鈕分家,從而兩個按鈕分別分別設計逐漸成為現在移液器的主流。當然,為了使用舒適,兩個按鈕與手指接觸的地方應該有比較大的面積,這樣讓手指在受力一定的情況下壓強能小些。
量程鎖定。目前市場上大部分移液器的吸/排液按鈕同時兼任調節量程的任務。當人們在進行移液操作時,拇指不可能完全向下用力,總有少部分力用到了旋轉按鈕的方向。因此,多次移液操作後,原來設定好的量程就可能被悄悄的「篡改」了!為了解決這個問題,不同的品牌各顯其能:有的品牌(如RAININ)在按鈕下方裝一個旋鈕,在調節量程前旋開而在操作前旋緊;有的品牌(如BIOHIT)在數字顯示窗口邊加一個小按鈕,只有按下這個按鈕,才可以調節量程。當然,有的品牌改的更徹底,如EPPENDORF和Hamilton的產品讓量程調節旋鈕與吸/排液按鈕分開,各司其職。
指鉤。所謂指鉤,顧名思義就是在移液器上部一個可以讓移液器掛在手指上的一個「小鉤子」。指鉤的作用有三:其一,將移液器的重量均勻的分布在食指指根上,讓手「感覺」移液器輕一點;其二,在移液過程中固定移液器,讓移液器不會隨拇指的下壓而向下移動,部分也減少了手的負擔;其三,在移液及移液間隙,讓手不需要時刻緊握移液器,從而讓手得到適當的放鬆。現在,各品牌的產品均有指鉤的設計,大多數也能實現指鉤的作用。然而,突出的反面教材是GILSON,其指鉤徒有其表而幾乎沒有任何實際作用。
量程數字顯示。這個話題的討論需要分兩個部分。第一部分,數顯的位數。四位數字顯示的代表是EPPENDORF,三位數字顯示(第四位用指針指示)的代表則是GILSON。顯然,四位數顯比三位看起來確實更直觀,並且似乎更精確(事實未必),但我們不得不說明兩點:一是數顯的位數與精度並不一定成正比,如GILSON的精度並不比EPPENDORF差;二是個別品牌的移液器是「偽四位數顯」,也就是看起來是四位,實際上第四位只能顯示「0」或「5」,步進量還不如大部分三位數顯的產品。第二部分,數顯的位置。對於絕大多數品牌而言,不外乎三個位置,一是指鉤的下方,如GILSON、RAININ和立洋(NICHIRYO)等,在移液操作過程中會被手蓋住,看起來會不太方便;二是指鉤的對面,如EPPENDORF、BIOHIT(m-Line)和BRAND(Transferpette S),在移液操作過程中方便查看,但與退吸頭裝置同側,設計精巧而有不結實之嫌;三是指鉤的側面,如Labsystem(現在注冊為Finnpipette)和BIOHIT(Proline),在右手操作時方便查看,但左手操作呢?說句調侃的話,這種設計有歧視左撇子的嫌疑。當然,也有個別產品搞特殊化,如BRAND(Transferpette,也就是BRAND俗稱的灰槍和白槍),其數顯的位置就在移液器的頂部(只是這么有個性的產品基本已退出市場,微憾)。
退吸頭裝置。退吸頭裝置有兩部分組成:上半部分指退吸頭按鈕和「隱藏」在槍體內的傳動裝置,這半部分不是討論的重點;下半部分是退吸頭臂,其主要設計要求是方便拆裝而不會自行松動甚至脫落。方便拆裝的目的是便於槍體下半部分的維護保養(國內的移液操作多不規范,維護保養不可或缺);如果會自行脫落則會影響移液操作。對此,EPPENDORF和GILSON的設計都過於老化,難以同時達到要求。做得比較好的是SOCOREX,其類似於旋鈕的設計比較完美的同時實現了上面兩項要求;另外,還有RAININ,其狀如蝴蝶扣的設計也能令人滿意。補充一句,SOCOREX的退吸頭臂的下端與吸頭上沿的距離可以調節,方便的適應了不同品牌的吸頭,這一設計也頗有見地。