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不锈钢细胞筛怎么清洗保存

发布时间:2022-12-23 15:40:20

❶ 小鼠肝脏组织单细胞解离

        肝脏,是脊椎动物身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面充分扮演着去氧化,储存肝糖,分泌性蛋白质的合成等。肝脏是由肝细胞组成,肝细胞极小,肉眼看不到,必须通过显微镜才能看到。人肝约有25亿个肝细胞,5000个肝细胞组成一个肝小叶,因此人肝的肝小叶总数约有50万个。肝细胞为多角形,有6-8个面,不同的生理条件下大小有差异,如饥饿时肝细胞体积变大。每个肝细胞表面可分为窦状隙面、肝细胞面和胆小管面三种。

       肝脏的主要连接成分主要是结缔组织,因此我们选择使用胰蛋白酶对肝脏进行第一轮解离,枯草芽孢杆菌蛋白酶可水解天然和变性蛋白,并且在碱性条件下具有活性。我们使用其对肝脏组织进行进一步解离。

      为了保存小鼠肝脏完整的基因表达谱,联川生物将成年小鼠肝脏置于冰上进行解离。小鼠肝脏第一层由0.25%胰蛋白酶在4℃下离解离10min,第二层解离由添加地衣芽孢杆菌酶,胶原酶及DNase I 组成的混合酶。解离产率为5000cells/mg,存活率大于等于93%(以AO/PI计数为标准)。

1.在预冷的组织保存液中保存及运输组织,配制酶解离液,置于冰上待用,离心机调整至 4℃ 预冷;

2.将放有你1/2 体积 DPBS 的培养皿置于冰上,使用无菌的剪刀及镊子剪切组织直至糊状;

3.使用 DPBS 对剪切的组织进行过筛清洗;

4.离心管中每30 mg肝组织中加入1 mL 胰酶 ,通过摇晃离心管重新悬浮组织颗粒,在室温下静置10 min。

5.在离心管中加入5mL预冷的DPBS,稀释胰蛋白酶混合液,终止消化。

6.在离心机中使用250g 4℃ 离心5min后,除去上清液;

7.在离心机中加入4mL预冷的DPBS重悬细胞核组织,在冰上沉淀40s 大组织块沉降(此时释放的细胞留在上清液中)。

8.将收集的上清液(含细胞)通过40µM细胞筛过滤,去除结团细胞及组织块;

9.过滤后的细胞悬液通过4℃ 300g离心 5min 收集;后再使用0.5 mL的PBS (含1% BSA)重悬细胞,置于冰上保存。

10.将步骤 7 中剩余的组织块加入组织解离酶(5mg/mL,胶原酶 IV 0.8mg/ml,DNase I  0.5mg/ml),置于37℃ 的摇床上 80rpm/min进行解离;

11.消化 8-12min之后,加入两倍体积的 DPBS稀释终止消化,取出离心管,涡旋仪上,轻微涡旋2-3次(2S/次)。

12.将终止消化后的酶及细胞混合物分别通过 70μm和40μm的细胞筛,下清液离心收集细胞。

13.在4°C下旋转300 g 离心5 min,除去上清液,使用DPBS(含1% BSA)重悬细胞,置于冰上备用。

14.将步骤9 ,步骤12中的细胞4°C下旋转300 g 离心5 min离心收集,弃上清;加入1-4mL红细胞裂液,置于冰上3-5min裂红。

15.裂红结束后加入等体积的DPBS, 在4°C下, 300 g 离心5 min 收集细胞,弃除裂红液;

16.使用0.5% BSA的DPBS重悬细胞,离心收集,弃上清,而后用含有0.5% BSA的DPBS重悬细胞,用AO/PI染料染色计数。

注意:肝脏组织中杂质及碎片较多,且肝细胞容易破裂;所以解离过程中要注意根据实际情况适当下调。富集细胞时的离心力,为达到彻底清洗碎片和杂质的目的,在解离过程中使用的解离酶浓度和强度不宜过高,获取的单细胞悬液如果用于单细胞测序,则需要在获取细胞悬液之后尽快进入下游建库,避免因细胞破裂引入RNA 污染问题,从而影响测序数据质量。

以上内容来自生信技能树和联川生物,有小伙伴如果照着这个步骤做了方便的话留言反馈效果如何哈~(带图的最好)

❷ 细胞筛可以重复使用吗

不建议重复使用,师兄推荐用的晶安生物70微米的还可以,望采纳!

❸ 有关细胞筛,多谢

200目,孔径0.076mm
1一般只是用来去除杂质
2可以重复使用,一般使用超声波清洗后在灭菌
3把溶液到在筛上在用吸漏过滤

❹ 细胞筛如何使用200目与300目区别大吗大鼠肺组织经细胞筛研磨后得到的是什么细胞

博凌科为解答:(1)细胞筛使用:洗干净、但不能泡酸,可以直接用锡箔纸包好湿式消毒,使用时不能干磨,比较大的组织边磨边加缓冲液;(2)200目与300目区别在于孔的大小,一般地,做流式区别不是很大,但300目的使用时注意不能研磨过分,以免结缔组织过多;(3)大鼠肺组织经细胞筛研磨后得到的是混合的细胞,包括肺实质细胞、基质细胞、红细胞和少量的白细胞、NK细胞以及巨噬细胞。

❺ 细胞筛应该怎么使用啊把溶液倒在筛上之后应该怎么办呢溶液不下漏啊

1. 太浓了,稀释后再用
2. 用移液枪抽吸几下

❻ 细胞筛网有一次性的吗

有的呀 我们实验室用的就是晶安生物的细胞筛网 灭菌好的直接使用

❼ 亲朋账号忘记了、怎么才能找回

对于自己不熟悉的事物,人们总是充满迷惑,甚至畏惧。这不锈钢水管看上去都差不多,价格相差也很大,身边又很少有人能给出专业的见解,上当受骗的情况也时有发生,下面从几个方面教大家怎样挑选不锈钢水管。 1.看产品的标记,一个正规的,合格的不锈钢水管,上面都会用激光清晰的打上品牌和代码,管件代码通常由产品代号,公称尺寸,材料统一数字代号,管材代码通常由产品代号,公称尺寸,公称压力,材料统一数字代号和生产日期等组成。合格的不锈钢水管对于厚度的公差,承受压力、水压,产品使用标准等都有严格的要求,上面的标记就是表明身份的记号。 2.看产品细节,不锈钢水管因为成本的原因,采用的是薄壁的有缝管,用制管机焊接而成,合格的不锈钢水管外壁因为打磨,肉眼无法看到焊缝;管内的焊缝平直,整齐;焊缝及焊缝周边没有明显的色变;不锈钢水管壁厚均匀,特别是焊接处无错位或凹陷,管身圆滑笔直;不锈钢水管的端口切口平整,无毛刺飞边。 3.看材质,能用来生产制造不锈钢水管的不锈钢材质不多,通常为304,316,更是以304为最,很多不良商贩用廉价的201不锈钢冒充价格较贵的食品级304不锈钢,304不锈钢是一种铬-镍不锈钢,而201是属于高锰低镍不锈钢,根据这个特性可选用不锈钢检验药水,304不锈钢在3-5分钟内不变色,201材质的不锈钢会在几秒钟后变成暗红色。 4.看生产厂家,一些没有资质的小企业,甚至是小作坊生产制造的不锈钢水管质量参差不齐,材料的品质得不到保障,不锈钢水管的加工环节多而繁杂,任何一项环节的疏忽都有可能导致不锈钢水管出现质量问题。大型的不锈钢水管生产企业往往有稳定的原材料供应商,成熟的管理体系和研发团队,优质的售后服务。 不锈钢水管看似简单平凡,但挑选优质的不锈钢水管却需要擦亮眼睛,需从各个方面检验筛选,但总归一点,选择大型的不锈钢水管生产商总会更加让人安心。

❽ 青蚕豆怎么保存剥好的蚕豆怎么保存

很多时候吃不了蔬菜我们总是放冰箱保存,或是腌制一些储存时间更久。那么,青蚕豆怎么保存?剥好的蚕豆怎么保存?
青蚕豆怎么保存
一:鲜物冷藏法。 新鲜蚕豆去掉外面硬壳 清洗干净。 放冰箱冷冻保存 随吃随取。

二:半熟冷藏法 将新鲜蚕豆清洗干净 放入开水煮熟,大概八分熟即可,然后捞出来,可以加入少许食盐,入味。 放在容器如簸箕、食物盆里晾干 然后放冰箱冷冻 吃的时候再解解冻就可以加工啦。

三:干物存储法。 来源自家的话等蚕豆长到成熟。 购买的话,直接购买干货。 晒干,晒到十分干,你懂的,湿润潮湿的食物容易滋生细菌或产生霉变的清洗干净存储,将蚕豆晒干,放置到通风、干燥处 或者放入皮不用全剥啊,一个小口子就行了。
剥好的蚕豆怎么保存
首先买一定量的蚕豆,当然具体数量根据实际情况来定,想要多吃多准备一些无妨。

把蚕豆皮去除,剩下蚕豆肉,剥的时候可以将坏子都挑出,用冷水反复冲洗干净。

将洗干净的蚕豆放入锅中,倒入大量的水,因为蚕豆比较轻会浮在水上,所以要有充分的水尽量不要接触的锅的底部。

把火调至最大把,锅不需要盖上盖子,直到锅中的水微微开始冒泡,那么就好了,不需要完全煮沸。

准备一个不锈钢筛子,塑料得不好。把筛子放在一个空锅上,可以直接过滤蚕豆上的水。

直接把锅中的蚕豆倒入筛子中,因为筛子的作用,蚕豆中的热水一滴都不要留,不然会把蚕豆焖熟颜色无法保持鲜艳。

迅速把蚕豆用冷水翻复冲洗,直至蚕豆没有一点热气,这个动作和刚才的用处是一样的为了保持颜色。所以要一气呵成,不要过一段时间再冲洗。

把冷却的蚕豆直接放入冰箱那么就可以新鲜的把蚕豆保存下来了。过几个月如果想吃,直接从冰箱中拿出直接炒,口感仍旧新鲜。
蚕豆的禁忌人群
遗传缺陷者

“蚕豆病”是因为体内缺乏某种酶类所致,是一种遗传缺陷,发生过蚕豆过敏者一定不要再吃。一旦发生这种病时,应赶快就医,以防意外。父母或祖父母有过这种病的人,不宜进食蚕豆及其制品,不宜沾染蚕豆花粉。

中焦虚寒者

有遗传性血红细胞缺陷症者,患有痔疮出血、消化不良、慢性结肠炎、尿毒症等病人要注意,不宜进食蚕豆。

低龄儿童

9岁以下儿童第一次吃蚕豆时一定要谨慎,儿童吃蚕豆后一旦出现低热、腹痛、皮肤发黄、尿色加深等症状,须立即送正规医院就医。

患有蚕豆病的儿童绝不可进食蚕豆。

蚕豆过敏者

蚕豆含有致敏物质,过敏体质的人吃了会产生不同程度的过敏、银屏性溶血等中毒症状,就是俗称的“蚕豆病”。这是因为体内缺乏某种酶类所致,是一种遗传缺陷,发生过蚕豆过敏者一定不要再吃。

❾ 细胞筛是什么材质

细胞筛
细胞筛一般多用于实验室细胞培养,杂质过滤,细胞分散,分样等方面。目前中国市场上的细胞筛种类很多,但是适应最广泛的还是美国BD FALCON细胞滤网、韩国SPL细胞滤网以及Toscience不锈钢细胞筛。
精彩视频
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目前中国市场上的细胞筛种类很多,但是适应最广泛的还是美国BD FALCON细胞滤网、韩国SPL细胞滤网以及Toscience不锈钢细胞筛,具体种类如下:
BD细胞滤网:
1.细胞滤网是取得单细胞悬液提供一种简单易行的方法。
2.BD Falcon 细胞滤网(细胞筛网)三种网孔径配合不同类型的细胞样品使用。
3.BD Falcon 细胞滤网不同的颜色可区别不同的孔径型号。
4.单独包装,聚丙烯材质,射线灭菌
5.BD Falcon 细胞滤网尤其适合50ml BD Falcon锥形离心管。
6.平均分布的40,70或100um孔,保证结果一致。

bd细胞筛[1]

SPL细胞滤网:
三种孔径供您选择,40um,70um,100um
·独立包装, Gamma射线灭菌
·聚丙烯材料框,尼龙网nylon mesh
·与50ml 离心管配套使用

spl细胞筛[2]

Toscience不锈钢细胞筛:
可以重复使用,一般使用超声波清洗后再灭菌。
正宗不锈钢304材质,医药专用。
Toscience过滤式细胞筛特点:过滤式不锈钢细胞筛,无柄直径3cm,高2.5cm,与50ml离心管配套使用
1. 细胞筛规格:直径 R=30mm ,高 H=25mm ,不带柄
2. 自产-纯不锈钢制品.筛网均达国际标准,均为出口产品.
3. 适用于细胞培养,杂质过滤,细胞分散等,是实验室必备产品.
4、可以重复使用,一般使用超声波清洗后在灭菌。
5、把溶液到在筛上在用吸漏过滤。

❿ 怎样可以把戒指清洗干净并且保持光亮呢!

清洗方法:

1、洁液洗净法用一个小碗或茶杯盛装温水,在水中调合适量的中性清洁剂。将钻石戒指浸在水中,用牙刷轻轻刷洗了再用一个网筛兜住,在水龙头下用温水冲洗(最后用一条柔软的无棉绒布拍乾即可。

(10)不锈钢细胞筛怎么清洗保存扩展阅读:

注意事项

1、洁精的化学物质会改变金子的色泽,所以做清洁工作之前应该脱掉金饰品。

2、避免直接与香水 、发胶等高挥发性物质接触,否则容易导致金饰褪色 。

3、游泳时要取下金饰,以免碰到海水或池水后,表层产生化学变化 。

4、保管的时候用绒布包好再放进首饰箱,避免互相摩擦损坏。

5、黄金比较软,容易变形,所以不要拉扯项链等饰品,以免变形。

6、纯金饰品在遇水银时会产生化学反应 ,出现白色斑点,清洗时只要在酒精灯下烧烤一会儿 ,就能恢复原色 。

7、配戴后的金饰常因污渍及灰尘的沾染而失去光泽, 此时,只要将金饰置于中性洗洁剂以温水浸泡并清洗,再取出拭擦干即可。

网络-戒指

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