A. dna亲子鉴定都需要哪些设备
2.2.1 试剂贮存和准备区 -20℃冰箱 紫外线灯 消耗品:一次性手套、一次性吸水纸 专用工作服和工作鞋 专用办公用品 微量加样器 2.2.2 标本制备区 冷藏、贮存两用电冰箱 台式高速离心机 混匀器 微型加热模块 微量加样器 紫外线灯 消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头 专用工作...服和工作鞋 专用办公用品 2.2.3 扩增反应混合物配制和扩增区 微量加样器 紫外线灯 消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头 二级生物安全柜 电冰箱 混匀器 台式高速离心机 专用工作服和工作鞋 专用办公用品 2.2.4 扩增产物分析区 FQD-33A荧光定量扩增仪 稳压器 紫外线灯 消耗品:一次性手套 专用工作服和工作鞋 专用办公用品 计算机 核子基因亲子鉴定 ——专业 准确 权威
B. DNA提取过程中所用到的主要设备有哪些他们各自使用的注意事项是什么
一:人体DNA的简易提取法
★所需的材料:①一茶匙盐,放进一杯水(自来水即可,绝对不能有杂质)里完全溶解、②一个干净的小玻璃杯、③一些洗涤液(去超市买正规的)、④一根滴管(可在化学品试剂店买)、⑤酒精度在50°以上的冰镇烈性酒(桶酿燕麦威士忌、质量上乘的杜松子酒、高度伏特加酒,或者抗菌酒精都能实现这项工作) ★制取方法:在干净的小玻璃杯里放入一茶匙洗涤液并用三茶匙水(自来水即可,绝对不能有杂质)稀释。用盐水在嘴里用力漱洗30秒钟左右,然后吐进稀释的洗涤液之中。用力搅拌混合物几分钟,然后非常小心地把两茶匙冰镇烈酒顺着玻璃杯的侧壁倒进去。如果你的手不能拿稳,可以使用滴管,把杯子稍微倾斜一下会对此有所帮助。这个步骤要求注意力非常集中,而且是非常关键的一步,必须要形成一个泾渭分明的水和酒之间的界限。如果你做到了细心谨慎,就将在盐和漱口水混合液的顶部形成单独的一层;等几分钟之后,你就会看到在酒之中开始形成纺锤形、白色、线状的团块样物质。这就是你的DNA。接下来如果有条件的话,可用1280倍的显微镜观察…… ★注意事项:在开始之前,一定要保证你的口腔是干净的。如果刚吃完东西,要等4个多小时后才能提取,以确保提取的精度。
二:动物DNA的简易提取法
(略为复杂一些) ★所需的材料:①鸡血细胞液5~10毫升(后面有鸡血细胞液的制作方法)、②铁架台、③铁环、④镊子、⑤三角架、⑥酒精灯、⑦石棉网、⑧载玻片(可在化学品试剂店买)、⑨玻璃棒、⑩滤纸、⑾滴管(化学品试剂店买)、⑿量筒(100ml一个)、⒀烧杯(100ml一个,50ml和500ml各2个)、⒁试管(20ml2个)、⒂漏斗(建议买3个)、⒃试管夹(建议买4个)、⒄纱布(建议买4个)、⒅体积分数为95%的酒精溶液(就是浓度为95%的酒精,实验前置于冰箱内冷却24小时,建议冷藏室的温度调节在4°~6°之间最好)、⒆蒸馏水(不少于500毫升)、⒇质量浓度为0.1%克/ml(毫升)的柠檬酸钠溶液、(21)物质的量浓度为2mol(摩尔)/L(升)和0.015mol/L的氯化钠溶液、(22)二苯胺试剂(本试剂是成瓶的)。 ★制取方法:①制备鸡血细胞→取刚杀过的鸡血(要干净,不能有杂质)50毫升左右,加入柠檬酸钠防止凝血;除去上面的清液,因为DNA主要存在于细胞核中。②提取核物质→加蒸馏水(一般是鸡血细胞的2倍半)并用玻璃棒搅拌不少于5分钟,使血细胞破裂,释放出的DNA往往和蛋白质结合在一起。③溶解核内DNA→DNA在高浓度的氯化钠溶液中溶解度很高,用2mol/L的氯化钠溶液可以加速核蛋白解聚,游离出DNA。④析出含DNA的粘稠物→加蒸馏水降低氯化钠溶液的浓度至0.14mol/L,此时DNA的溶解度下降,蛋白质的溶解度增高,从而使DNA和蛋白质分离,析出DNA(注意:此步骤要精确浓度)。⑤滤出含DNA的粘稠物→用纱布过滤得到丝状DNA的粘稠物。⑥DNA粘稠物再溶解→加入2mol/L的氯化钠溶液后,充分搅拌,使DNA溶解。⑦过滤含DNA的氯化钠溶液→用新纱布过滤。⑧提取较纯净的DNA→加入冷却的浓度为95%的酒精,使DNA沉淀、浓缩、形成含杂质较少的白色丝状物。⑨DNA的鉴定→DNA的鉴定可用二苯胺法,DNA遇到二苯胺变为蓝色;还可以用“甲基绿”法,“甲基绿”使DNA变为蓝绿色。 ★注意事项:①盛放鸡血细胞的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎后,DNA容易被玻璃容器吸附。因此,实验中最好使用塑料的烧杯和试管,可以减少提取过程中DNA的损失。②实验中搅拌含有悬浮物的溶液时,玻璃棒不要直插烧杯底部,同时搅拌要轻慢。③用“甲基绿”法鉴别DNA时,可将“甲基绿”直接滴到玻璃棒的丝状物上后,要用水充分冲洗掉浮色后再观察。
三:植物DNA的简易提取法
(提取时千万要注意里面的步骤!!!) ★所需的材料:①新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。②塑料烧杯一个。③量筒(规格和数量同上)。④玻璃棒一个。⑤尼龙纱布(数量同上)。⑥陶瓷研钵一个(最好用陶瓷的)。⑦试管(数量同上,没标明数量的要同时准备两个,以备用)。⑧试管架(数量同上)⑨试管夹(数量同上)。⑩漏斗(数量同上)。⑾酒精灯一个。⑿石棉网(数量同上)。⒀三角架。⒁火柴一把(小火柴)。⒂刀片一把(小刀即可)。⒃天平。⒄研磨液(可在化学品试剂店买)。⒅体积为95%的酒精溶液(体积就是浓度)。⒆二苯胺试剂一瓶。⒇蒸馏水(不少于500毫升)。(21)塑料离心机一台(也可用食品加工机代替)。 ★制取方法:①准备材料→将新鲜菜花和浓度为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室内,至少24个小时,建议48个小时,冷冻室的温度要调成-18°以下。②取材→称取30克菜花,去梗取花,切碎。③研磨→将碎菜花放入研钵内,倒入10毫升研磨液,充分研磨10分钟,建议15分钟。④过滤→在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的可将滤液滤入塑料离心机中离心,用1000转/分钟的速度旋转,离心5分钟,取出上面的清澈液体放入烧杯中。[也可用食品加工机代替,但速度一定要有保证!])在4°的冷藏室中放置5~6分钟后,再取上面的清澈液体。⑤加冷酒精→将一倍体积的清澈液体倒入两倍体积浓度为95%的冷酒精中,并用玻璃棒缓缓地轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要插入烧杯底部)。沉淀3~5分钟后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。⑥配制二苯胺试剂→取0.1毫升B液,滴入到10毫升A液中,混匀。⑦鉴定→取4毫升DNA提取液放入试管中,加入4毫升二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100°)加热10分钟。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。 ★注意事项:①一定的冷冻时间是绝对要掌握好的,因为植物的DNA提取不易。②研磨的时间也要掌握好,理由同前。③要想好一切步骤,一举呵成,就是要抓紧时间,理由同前。
C. DNA鉴定需要什么
您好,很高兴帮您解答!亲子鉴定可以分为司法鉴定和个人鉴定。司法鉴定是专指必由相关机构出具委托书属,经过一系列司法公正程序所完成的鉴定,具有法律效力,可作为法庭证据使用。个人鉴定仅是对个人的遗传基因所做的生物学比对,鉴定流程相对简单,但不能作为法庭证据使用。私人鉴定只需要采集标本(口腔细胞、毛发、血液等),交纳鉴定费用即可。
到正规医疗机构鉴定,不要轻信广告。
D. 做DNA亲子鉴定都需要准备些什么东西
DNA亲子鉴定分个人亲子鉴定和司法亲子鉴定: 个人亲子鉴定:只需提供要鉴定人的样本,如父子或母子双发的血样或毛发等(为了自己心中有数)。 司法亲子鉴定:是为提供法律证据的,除了要提供鉴定的样本外,还需要提供身份证等及司法部门要求的文件等。 (注:)想了解更多请浏览湖南省中瑞司法鉴定中心网站,网络搜索:湖南省中瑞司法鉴定中心即可。 希望以上信息会对你有所帮助!
E. 做dna检测鉴定需要哪些准备
如果是个人隐私亲子鉴定类型,可以直接邮寄资料及样本到佛山康瑞基因进行dna检测就可以了,司法鉴定类型则需要本人携带身份证、户口本等原件前往鉴定机构了。
F. DNA鉴定,需要什么手续和多少费用
一、DNA鉴定手续/流程
1、匿名鉴定流程
(1)客户通过电话、在线客服向鉴定单位咨询预约;
(2)客户自行采样,或预约采样员上门采样,或前往采样点接受免费采样;
(3)由专业人员验看客户提供的样本;
(4)付款缴费;
(5)鉴定人检测样本;
(6)五至七个工作日出报告。
2、常规鉴定流程
(1)客户通过电话、在线客服向鉴定单位咨询预约;
(2)孕妇由专业人员陪同至正规三甲医院进行胎儿羊水或绒毛的采样。胎儿父母的样本可自行采样,或预约采样员上门采样,或前往采样点接受免费采样;
(3)由专业人员验看客户提供的样本;
(4)付款缴费;
(5)鉴定人检测样本;
(6)五至七个工作日出报告。
3、无创胎儿鉴定流程
(1)客户通过电话、在线客服向鉴定单位咨询预约;
(2)预约采样员上门采样,或前往采样点接受免费采样;
(3)付款缴费;
(4)鉴定人员检测样本;
(5)十到十五个工作日出结果。
4、 落户口亲子鉴定流程
(1)客户通过电话、在线客服向鉴定单位咨询预约;
(2)客户预约采样员上门采样,或前往采样点接受免费采样。采样前由采样员核对身份信息。
(3)由专业人员验看客户提供的样本;
(4)付款缴费;
(5)鉴定人检测样本;
(6)五至七个工作日出报告。
5、司法亲子鉴定流程
(1)客户通过电话、在线客服向鉴定单位咨询预约;
(2)被鉴定人携带有效身份证件亲自到鉴定单位
(3)工作人员核对被鉴定人身份信息并留取复印件;
(4)工作人员对证件和被鉴定人分别拍照;
(5)由专业人员采集样本;
(6)付款缴费;
(7)工作人员立即将样本送往实验室检测;
(8)五至七个工作日出报告。
二、费用
1、个人亲子鉴定常规样本(血痕、口腔粘膜)鉴定费用为800元/样本,毛发亲子鉴定费用为1000元/样本。特殊样本(口香糖、混合斑、经血、指甲、烟头、纯精斑、胎儿流产物、脐带血、牙刷、牙齿、病理组织、切片、脐带血等)检测难易程度不一,收费也略有差异。
2、落户/诉讼/移民等司法亲子鉴定 1000元起/样本
3、孕期无创亲子鉴定约六到七千元/例
DNA亲子鉴定原理:
一个人有23对(46条)染色体,同一对染色体同一位置上的一对基因称为等位基因,一般一个来自父亲,一个来自母亲。如果检测到某个DNA位点的等位基因,一个与母亲相同,另一个就应与父亲相同,否则就存在疑问了。司法亲子鉴定中心利用DNA进行亲子鉴定,只要作十几至几十个DNA位点作检测,如果全部一样,就可以确定亲子关系,如果有3个以上的位点不同,则可排除亲子关系,有一两个位点不同,则应考虑基因突变的可能,加做一些位点的检测进行辨别。DNA亲子鉴定,否定亲子关系的准确率几近100%,肯定亲子关系的准确率可达到99.99%。
G. DNA提取过程中所用到的主要设备有哪些
DNA提取过程中所用到的主要设备有哪些
DNA的粗提取
①准备材料 将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24 h。
②取材 称取30 g菜花,去梗取花,切碎。
③研磨 将碎菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min 。
④过滤 在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1 000r/min的旋转频率,离心25 min,取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰箱中放置几分后,再取上清液。
⑤加冷酒精 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中,并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。
(2)DNA的鉴定
①配制二苯胺试剂 取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混匀。
②鉴定 取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100 ℃)加热10 min 。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。
研磨液的配制方法
Tris:10.1 g(相对分子质量为121.14),先加50 mL 蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 moL/L 的盐酸调至pH8.0,再加下述药品。
NaCl:8.76 g(相对分子质量58.44)
EDTA:37.2 g(相对分子质量372.24)
SDS:20 g(相对分子质量288.3)
待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定容至1 000 mL。
若在室温低于20 ℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解。如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用。
研磨液中几种药品的作用
SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离。
EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA。
物质的量浓度为0.15 moL/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA。
Tris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态。(Tris为三羟甲基氨基甲烷)
鉴定DNA的其他方法 用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1.配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。
2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴1滴EB溶液染色。
3.将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中),可见橙红色的萤光(DNA的紫外吸收高峰在280 nm处)。