流式细胞检测用什么设备

① 流式细胞仪的原理是什么

最近一直在了解流式细胞术和流式分选的知识，看到这个问题想回答一下：

流式细胞仪是以流式细胞术为基础，快速精确的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选。分析流程为：制备单细胞悬液，用特异性荧光染料标记的抗体进行染色，经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室，在鞘液的包裹下细胞呈单行排列，依次通过检测区域，在激光束的照射下细胞会产生散射光和激发荧光。这两种信号会同时被光电倍增管( PMT) 接收。接收后可转换为电信号，通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号，进行分析。

如上所述，流式细胞仪是由液流系统、光路系统以及检测分析系统三部分组成，部分仪器还具有分选功能，能对粒子进行充电和偏转从而实现细胞分选。

1. 液流系统：通过产生压力使含有目的细胞的样本快速进入仪器，在封闭的样品管中利用样品和鞘液之间的压力差是样本聚集到光学分析系统；

2. 光路系统：由不同的激光器发射出的激光照射到细胞表面产生光信号，而后经过不同的光路系统被接收。在流式照射室的分析点，激光照射到细胞表面发生散射和折射，并发射出散射光包括前向散射光（FSC）和侧向散射光（SSC）,同时细胞表面的荧光素被激发发射出荧光。前向散射光和侧向散射光检测器收集散射光转变为电信号；荧光则被聚光器收集，不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增检测器，将荧光信号也转变成电信号。FSC和SSC是流式分析中两个非常基本的参数。FSC的值能代表细胞的大小，细胞的体积越大则FSC就越大。SSC则代表细胞的颗粒度，细胞内细胞器和颗粒度越大则SSC越大。

3. 检测分析系统：荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原强度或细胞内物质的浓度，光信号转换为可被计算机识别的电信号。计算机把所测量的各种信号进行处理分析。

4. 流式细胞分选是在流式细胞术的基础上进行的。在流动室的喷口上方配有一个超高频的压电晶体，产生的振动使喷出的液流形成均匀的液滴，待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷（对标有荧光素的细胞液滴带以负电荷；未标记荧光素的细胞液滴带以正电荷；而不含有细胞的液滴则不被带电荷），当液滴流经偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不带电荷的液滴落入废液容器，从而实现细胞的分离。

   第一次回答希望能帮到你，如有理解不当的地方，欢迎指正！

② 如何用流式细胞仪检测细胞内的ROS

流式检测ROS的特异性比较差。一般来说，针对过氧化氢和超氧化物有荧光探针。加到版细胞培养液后，细权胞摄龋遇到ROS，可以发出荧光，上机检测可以比较各组之间荧光强度的变化从而代表ROS水平的不同。你这个图横坐标代表的是相对荧光强度，纵坐标代表的是细胞计数。 图的含义就是在每个荧光强度有多少细胞。 估计你用了氧化敏感的荧光指针，ROS反应后荧光增加。所以你应该先用对照组设一个阈值，看实验组的荧光强度有没有高于或者低于该阈值。

③ 哪些流式细胞仪采用pmt检测器

市场上绝大多数的主流仪器，比如常见的BD LSR II， BD Aria都是采用PMT的

④ 细胞检测为什么要用流式细胞检测技术

和其他技术相比，流式的特点如下：
可以一次在很短时间内检测版大量的细胞数目权，比如在数分钟内记录分析数百万的细胞。每个细胞都可以是多荧光染色的。根据机器的配置不同，可以同时分析20种左右的指标。特点总结为简单的词就是，快，多。
流式不光能检测细胞，凡是大小和细胞相仿的颗粒，都可以检测。所以现在还发明了以微球为基础的溶液细胞因子检测，一次可以检测数十种的细胞因子浓度。

⑤ 流式细胞分析仪 什么牌子好

现在流式细胞仪的厂家很多。没有啥最好一说，而是根据你的需求，能回满足你需求和有能负答担得起的就是最好的。

开口就说啥牌子贵，啥牌子好是不负责任的广告。

具体考虑一下几个因素：多少个激光，多少个通道。即使型号相同的机器，配置了不同的激光，价格也相差很多。还有就是激光的功率，和光路的几何形状，功率越大，光路直径越小，分辨率就越高。第二是运行的成本。大部分的机器是靠鞘液来带样本的，需要随时添加。有些可以采集微量样本。有些是注射器形式吸取样本，同时可以定量。

还要考虑的就是维护成本，包括日常配件，或者日后保修合同的价格等等。

目前市场上，除了常见的BD， beckman, Millipore, Life technology等国际大型公司的产品，还有一些小公司的产品也很有特色。

总之要看你购机的需求是啥。

我在美国从事流式细胞仪工作很多年了。你有啥需求，我可以给你专业建议。

⑥ 流式细胞仪在实验室主要用于哪些检测

流式可以检测的样本很多：
细胞表面的蛋白，通过荧光抗体直接标记
细胞内回部的蛋白，细胞固定，答通透后再用荧光抗体识别
细胞内部的DNA含量，细胞固定，通透后加DNA染料
细胞内部钙离子浓度，直接加钙离子浓度荧光染料染色
细胞内部线粒体膜电位，比如JC-1，罗丹明染料
使用微球阵列，可以同时检测溶液中数十种可溶性蛋白的浓度

⑦ 流式细胞仪检测需要哪些试剂耗材

耗材：

1. 流式的试管

2. 细胞滤网

3. 加样的吸管枪头

试剂：

1. 染色的各种染料，标记好的荧光抗体

2. 染色所需要的缓冲液，封闭液，PBS

3. 最终由于上样的缓冲液
   

⑧ 用流式细胞仪检测CD4 CD8 怎么做啊 准备什么

这个是T细胞表面标记。

所以要准备好：

1. 被测样本的单细胞悬液。可以是去红细胞的血细胞，分离的淋巴结或者脾脏的细胞

2. 准备4个管子，分别为无染色，单染CD3， 单染CD4和单染CD8，每管至少准备10-20万细胞。用来设置机器和compensation

3. 同样的方法，用三种抗体同时染样本

4. 分析结果。
   
   典型的结果一般和下图类似

⑨ 流式细胞术的原理在哪些检验仪器或技术平台中还有应用

血细胞分析仪和尿沉渣分析仪都有应用，可以形成连续的单细胞液柱，对每一个细胞逐个分析

⑩ 如何用流式细胞仪检测GFP的表达

流式细胞仪原理简单来讲就是将细胞包裹在细细的液流中，将细胞以一个专一个的形式通过激光，GFP本身属属于绿色荧光蛋白，受到488左右的激光激发会释放出荧光，通过检测侧向散射的荧光强度经过信号放大可以得到样品的荧光情况。
具体的操作根据设备的不同都有不同，建议直接查看仪器的操作手册，但基本原理都是相同的，需要先将要鉴定的细胞消化、过滤网去除大块杂质，然后细胞悬液经由上样管进入流式分析仪或分选仪。第一次鉴定的话，需要准备阴性及阳性的对照，即不表达GFP的同种细胞，用该细胞设门，再上带有GFP的细胞，检测未知样品时，用FITC或相对应的通道的信号强度，去除阴性的门就是阳性的细胞亚群了。