㈠ 组培实验室一般有哪几个部分组成,各部分的功能
组织培养室设计由缓冲间、准备室、无菌间、培养室和炼苗室五个区室组成。
1、缓冲间:进入实樱让验室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入实验室杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
2、无菌间:主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。主要仪器设备:超净工作台。
3、培养室:是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。主要仪器设备:培养架和光照培养箱。
4、炼苗室:主要用于对无菌幼苗强行锻炼的场所,使其定植后能够迅速适应露地的不良环境条件。
整个实验室均以塑钢玻璃隔断,须封顶并加装空调,墙面需改造成为墙漆覆盖,天花板要选择光滑无灰尘的材质。
(1)做组培需要什么仪器设备扩展阅读
由于组织培养过程中器皿的重复利用,特别是培养基中有机物质及培养组织分泌物的附着,影响再次培养,导致实验结果发生误差,甚至使培养组织受到毒害。同时,一些新制玻璃器皿,都部分的存在碱性游离物,也影响到实验结果的滚伏准确性。
因此,新的或重新使用的器皿都必须认真清洗,使其达到不留任何残留物的要求。因不同培养器皿的材料、结构脊备局、使用方法不同,清洗的方法也不同。
㈡ 组建一个组培实验室要多少钱
这个看你要做哪行!比如温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、摇床、恒温培养箱、人工培养箱、分析天平,天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架、封口膜,培养瓶,试管,培养皿,专用记号笔,托盘,手术接种剪,直镊,枪型接种镊,手术刀柄,超净工作台,接种灭菌器,不锈钢接种盘,组织培养架,光照培养箱,人工气候箱,生化培养箱,霉菌培养箱,恒温恒湿箱,照度计,PH计,酸度计,电导率仪,干湿温度计,玻璃棒温度计,电子天平,架盘天平,精密电子秤,低温储藏箱,恒温振荡器,磁力搅拌器,离心机,生物显微镜,高压灭菌锅,培养基定量灌装机
㈢ 组培育苗的仪器设备有哪些
组培育苗必要的仪器设备:为了顺利地开展组培育苗工作,要建立一套组培育苗工作的设施,其中包括准备室、接种室、培养室和相应的温室等。建筑面积可根据工作量的大小而定。
(1)准备室主要功能是贮放配制培养基所必需的化学试剂及仪器设备,如冰箱、烘箱、天平、显微镜、酸度计、高压灭菌锅、玻璃器皿及洗涤设施等,并为配制培养基、分装和灭菌等操作提供便利的条件。
(2)接种室主要供接种、转移和继代培养用。要求室内光洁,能在无菌条件下进行操作。一般是购置超净工作台,配备用于对外植体进行分割、消毒和接种的工具和器皿等。
(3)培养室主要为试管植物的生长发育提供适宜的环境条件。要求有控制温度和照明的设备、放置试管等物的架子、消毒用紫外灯等。
2.培养基的组成与配制:培养基是用于组织培养繁育花苗的物质。它包括植物的细胞、组织或器官再生所必需的大量元素、微量元素、扮弯虚蔗糖、维生素、氨基酸和植物激素等。
用于繁殖花卉植物常用的培养基有:MS、H、N6、尼许(Nitsh)、怀特(White)、米勒(Miller)培养基等。这些培养基配方见表3-1至表3-6。
表3-1:MS培养基配方(毫克/升)
表3-2:H培养基配厅燃方(毫克/升)
表3-3:N6培养基配方(毫克/升)
表3-4:尼许(Nitsh)培养基配方(毫克/升)
表3-5:怀特(White)培养基配方(毫克/升)
表3-6:米勒(Miller)培养基配方(毫克/升)
配制培养基与配制营养液基本相同,只是在加入无机盐之后不定容,而是以每升培养基所需的粉剂原料加水800毫升左右,加热煮沸,使琼脂完全融溶,冷却到80℃左右加入蔗糖,60℃左右加入有机物,调节氢离子浓度并定容,在温度尚未降至40℃以前,尽快分装到闹含试管或三角瓶中,用棉塞或牛皮纸封口,然后在120℃温度下灭菌15分钟。
㈣ 组培室的功能区分和常用仪器工具
组培室建设首要考虑的问题就是组培室需要哪些设备条件和需要什么样的培养条件。对这些有了全面了解以后,我们便可以因地制宜地新建或利用现有房屋建设实验室。在设计组培室时,一般情况应按组培的流程来设计,同时考虑人物分流顺畅,空间合理利用。植物组织培养要求严格的无菌的条件,需要一定专业仪器设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
第一、实验室
一个标准的组织培养实验室应当包括洗涤室、�配置室、接种室、培养室、观察室(冷却室)、灭菌室、洗苗室等。在实际中可结合可行条件,合并一部分。
(一)洗涤室
洗涤室完成玻璃器皿和其它仪器的清洗、干燥和贮存。室内应配备大型水槽,用于培养器皿的洗涤,最好是内衬白瓷砖的水泥槽。为防止碰坏玻璃器皿,可铺橡胶板,上下水道要畅通。备有大型塑料筐,用于放置培养器皿。可直接置于搁架上,以节约空间和便于运输工作。备有空干架,以空干涮净的培养器皿。
(二)配置室、灭菌室(可分开)
准备室要求明亮、通风。在准备室内要完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。如果房间较多,可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。洗涤室专门负责试管苗出瓶与培养器皿的清洗工作;配置室则负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。
为完成培养基的制备工作,准备室还应配备以下仪器设备:
1.工作台
其高度应方便配制工作。
2.药品柜
用以放置常用药品。
3.普通冰箱
主要用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等。
4.电子分析天平和托盘天平
电子分析天平精确度为0.001g,用于称取大量元素、微量元素、维生素、激素等微量药品;托盘天平精确度为0.1g,用于称取用量较大的糖和琼脂等。天平应放置在干燥、不受振动的固定操作台上。
5.纯水仪或电蒸馏水器
纯水仪提供纯水,水质好。电蒸馏水器, 采用硬质玻璃或金属制成。蒸馏水用于配制母液或培养基,配培养基可用自来水来代替,若实验要求严格的话,则须用蒸馏水。
6.磁力搅拌器
磁力搅拌器用于加速搅拌难溶的物质,如各种化学物质、琼脂粉等 。磁力搅拌器还可加热,使之更利于溶解。
7.恒温水浴锅或恒温振荡水浴
水浴锅用于难溶药品的溶解、琼脂的溶化等。若没有水浴锅,也可用1500或2000W电炉或电饭锅代替。电炉应配有铝锅。
8.酸度计
组织培养中培养基pH值的准确度是十分重要的,应当使用酸度计,若无酸度计,也可使用pH试纸进行粗测。首次使用酸度计前,应用标准液调节定位,然后固定。 测量pH时,待测液必须充分搅拌均匀。如果培养基温度过高,测量时要调整pH计上的温度扭使之和培养基温度相当。注意保护好玻璃电极,用后电极应用蒸馏水冲洗净,盖上电极帽。
9.培养基分装设备
小型组织培养实验室可采用烧杯、漏斗等作为分装培养基的工具。也可采用医用“下口杯”作为分装工具,在“下口杯”的下口管上套一段软胶管,加一弹簧止水夹,使用时非常合用。更大规模或要求更率时,可考虑采用液体自动定量灌注设备。
10.高压灭菌锅
用以进行培养基和器械用具的灭菌。小规模实验室可选用小型手提式高压灭菌锅。如果是连续的大规模生产,应选用大型立式的或卧式的高压灭菌锅。通常以电作能源。
11.烘箱
用于干燥洗净的玻璃器皿,也可用于干热灭菌和测定干物重。用于干燥需保持80~100℃;进行干热灭菌需保持150℃,达1~3小时;若测定干物重,则温度应控制在80℃烘干。
12.恒温培养箱
内有温度调节器,生化培养箱还配有光源,用于植物材料的培养。
(三)接种室
接种室是是进行植物材料的分离接种及培养物转移的一个重要操作室。其无菌条件的好坏对组织培养成功与否起重要作用。
在工作方便的前提下,无菌操作室宜小不宜大,一般7~8m2;要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光洁,易于清洁和消毒。无菌操作室应配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
无菌操作室要求干爽安静,清洁明亮,在适当位置吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以经常地照射灭菌。最好能安置一小型空调,使室温可控,这样可让门窗紧闭,减少与外界空气对流。
无菌操作室应设有缓冲间,面积2 m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外灭菌灯,用以照射灭菌。
无菌操作室的主要设备及用具有:
1.接种箱
在投资少的情况下,可以用接种箱来代替超净台。接种箱依靠密闭、药剂熏蒸和紫外灯照射来保证内部空间无菌。但操作活动受限制,准备时间长,工作效率低。
2.超净工作台
超净台的优点是操作方便自如,比较舒适,工作效率高,准备时间短。开机10分钟即可操作,可进行长时间使用。并可以保证无菌材料在转移接种过程中不受污染。。
3.无菌操作用的器具。
按单人超净台上的用量计:酒精灯1个;20~25cm长的医用镊子1把;4号解剖刀1把,解剖刀片若干;15cm医用剪1把;500ml广口瓶1只,内放酒精,现代专业组培室多用接种器械灭菌器和容器口灭菌器,用于浸泡镊子、刀、剪等;用于架放灼烧过的刀、镊子的小架。
4.搁架。
贮放高压灭菌后等待接种的培养基。
(四)培养室
是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根据需要的培养架的大小、数目、及其它附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火的性能。
培养材料放在培养架上培养。�培养架大多由金属制成,一般设5层,�最低一层离地高约10厘米,其它每层间隔30厘米左右,培养架即高1.8米左右。�培养架长度,因一般在每层上端装置日光灯,以供照明,所以都是根据日光灯的长度而设计,如采用28W日光灯,则长1.25m,21 W的长1米即可。宽度一般为50cm。
培养室最重要的因子是温度,一般保持在20~27℃左右,可安装窗式或立式空调机。要求温度因热带植物和寒带植物等的种类不同而异,最好不同种类有不同的培养室。
室内湿度也要求恒定,相对湿度以保持在70~80%为好,可安装加湿器。
培养架上装置日光灯时,可安装定时开关钟控制照明时间,植物组织培养的光照强度一般在1000~4000勒克斯(lux),每天照明10~16小时,也有的需要连续照明。短日照植物需要短日照条件,长日照植物需要长日照条件。
现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为能源,这样不但可以节省能源,而且组培苗接受太阳光生长良好,驯化易成活。在阴雨天用灯光作补充。
补光光源目前专业的组培室用全光谱冷光灯或led组培专用灯。
第二、 设备和器材
(一)玻璃器皿
在组织培养中配制培养基和进行培养需大量的玻璃器皿。要求由碱性溶解度小的硬质玻璃制成,以保证长期贮存药品及培养的效果;培养用的还要求透光度好,能耐高压高温,能方便放入培养基和培养材料的器皿,根据培养的目的和要求,可以采用不同种类、规格的玻璃器皿.其中以试管、三角瓶、培养皿等使用较多。
最常使用的是三角瓶,规格有100、250、500毫升等, 一般使用100毫升三角瓶,无论静止或振荡培养皆适用。其培养面积大,利于组织生长,受光也比试管好。由于瓶口较小,亦不易污染。
培养皿常用9、12厘米直径等规格,要求上、下能密切吻合。这在游离细胞、 原生质体、花粉等的静置培养、看护培养、无菌种子的发芽、植物材料的分离等都需采用。
试管常用口径18×180 mm或20×200mm规格。可用于培养较高的试管苗 ,另外也不易污染。
培养器皿还可就地取材,采用一些代用品。工厂化生产可采用广口的200ml左右罐头瓶,加盖半透明的塑料盖,由于瓶口大,所以大量繁殖时操作方便、工作效率高,也减少了培养材料的损伤。但缺点是易引起污染。
目前,培养容器和制备培养基所需的玻璃器皿渐被塑料器皿所代替。塑料容器具有质轻、透明、不易破碎、成本低等优点,如培养容器多为平底方盒形,可增加培养的植株数,并能一层层地叠摞起来,从而节约空间。这类塑料制品多是采用聚丙烯材料制成,能耐高温,可进行高压灭菌。有些产品为一次性消耗品,不但可节省洗涤人工,还可节省时间,提率。一次性塑料容器或带螺丝帽的玻璃瓶,无须另外配盖,使用时是非常方便的。
瓶口封塞可用多种方法,要具有一定的通气性和密闭性,以防止培养基干燥和杂菌污染。以前封口常用棉塞。不过这种封口办法夏季极易污染,且不易保持培养基湿度。现在多采用聚丙烯塑料膜作为封口,以线绳结扎或橡皮圈箍扎。为了增加通气性,可在里面衬一层硫酸纸或牛皮纸。这样经济方便,且通气好。也可采用专用的封口材料如封口膜。
在组织培养中配制培养基,贮藏母液,材料的消毒等需要各种化学实验用的玻璃器皿,包括100、250、1000毫升烧杯;100、1000毫升量筒; 100、1000毫升试剂瓶(棕色)等等。
(二)器械用具
1.镊子类
主要采用医疗上用的镊子。根据操作的需要有各种类型,若用100毫升的三角瓶作为培养瓶, 可用220厘米长的镊子。镊子过短.容易使手接触瓶口, 造成污染。镊子太长,使用起来不灵活。某些微小部分的精细操作则用钟表镊子, 如在分离茎尖幼叶时,由于其尖端锋利,所以几乎可代替剪刀使用。
2.剪刀类
可采用五官科用的中型剪刀。主要用于切断茎段、叶片等。也可以用弯形剪刀,由于其头部弯曲,可以深入到瓶口中进行剪切。
3.解剖刀
切割较小材料时可用解剖刀。 分离茎尖分生组织,有时也用解剖刀。常用的解剖刀刀片可以经常调换,刀口要保持锋利状态,否则切割时会造成挤压,引起周围细胞组织大量死亡,影响培养效果。
4.解剖针
解剖针用于深入到培养瓶中, 转移细胞或愈伤组织。也可用于分离微茎尖的幼叶。
组培室设计 组培室建设,组培仪器设备——济南腾昊科学仪器有限公司
㈤ 植物组织培养简易配备条件
组培设备与条件
开展植物组织培养工作需要一个比较合理实用的场所,一套适宜的设备和提供必要的实验环境条件,这是首先要考虑到的。根据科学、合理的原则,一个较为理想的配置应该包括圆基谨:
1、化学药品室。
2、配培养基室。
3、灭菌室。
4、接种室。
5、无菌培养室。
基本仪器设备与用品
1、仪器设备
超净工作台、高压灭菌锅(手提式、立式或卧式)、小推车(可选)、精密电子天平(至少千分之一)、电子天平或托盘天平、酸度计、普通冰箱、烘箱、解剖镜、光照培养箱(选购)、电炉、微量可调移液器及配套吸嘴橘基。
移液管架、磁力搅拌器(可选)、不锈钢托盘、灌装机(可选)、培养架、定时器(控制光照时间)、紫外线杀菌灯、照度计(可选)、温湿度计(可选)蒸馏水器、摇床(可选)、针头滤器及配套滤膜。
2、小型用品
枪镊,弯剪、解剖刀、接种盘。
3、玻璃器皿
组培瓶(玻璃或塑料)、烧杯、量筒、移液管、试剂瓶、移液管架、容量瓶、试管、酒精、玻璃棒、滴瓶。
4、组培药品(详细药品请见常用配方)。
5、其他
吸耳球、刷子、记号笔、定时钟、手套、封口膜、卫生药棉、拖鞋、口罩、白大褂、滤纸、锋仔洗瓶。
㈥ 植物组织培养需要哪些设备
1.实验室的准备:
(1)化学实验室:组培时的洗涤、干燥、保存;培养基的配制和分装;高压灭菌;处理大型植物材料,以及进行生理、生化分析都在化学实验室进行。其要求与一般化学实验室的要求相同。
(2)接种室(无菌室):设有超净工作台或接种箱,用于无菌接种。要求室内光滑平整,地面平坦无缝,避免灰尘积累。室内要求定期用甲醛或高锰酸钾薰蒸消毒灭菌,也可用紫外线灯照射20分钟以上。
(3)培养室:室内要求整洁,有控温,照明设备及培养架等装置。室内温度要求恒温,有自动调温设备,一般要求25~27℃或依所培养的植物而定。光源以白色荧光灯为好。
除以上必备设备外,有条件时还可设细胞实验室及摄影室。
2.仪器设备:
(1)天平:天平精确度为0.1克的药物天平。精确度为0.001克和精确度为0.0001克的分析天平,分别用以称取培养基中的蔗糖,琼脂,大量元素,微量元素和激素类等药品。
(2)烘箱和恒温箱:用于烘干玻璃器具及测定培养物的干重量等。
(3)冰箱:贮藏各种维生素、激素及培养基母液,保存实验材料及材料的低温处理等。
(4)酸度测定仪:测定培养基的pH。
(5)高压灭菌锅:培养基和玻璃器皿等用具的高压灭菌。
此外,还应配备显微镜、显微摄影、离心机以及悬浮培养用的转床、摇床等。
3.玻璃器皿和用具:
常用的玻璃器皿有各种类型的试管、三角瓶、培养皿、量筒和烧杯等。常用器具可选用医疗器械或微生物实验所用的各种镊子、剪刀、解剖刀和解剖针等。