细胞自动培养装置

㈠ 单细胞可视化分选培养系统-isoCell重磅来袭！单细胞分选、培养一体化前沿技术，让单克隆细胞成活率更高！

近年来，单细胞组学、单细胞克隆研究和循环肿瘤细胞研究的进展，突显了高效准确分选单细胞的重要性和紧迫性。针对此需求，英国iotaSciences公司推出了单细胞可视化分选培养系统-isoCell，该系统不仅确保了分选样品的高纯度（单个单细胞），分离效率高达100%，而且实现了单个细胞的自动化培养，全程可验证和追踪，确保了单克隆细胞系的高品质。

Quantum Design中国作为iotaSciences公司的战略合作伙伴，引进了单细胞可视化分选培养系统-isoCell，为中国科研人员提供了可靠且功能强大的单细胞分选与培养解决方案。该系统的核心技术——网格式单细胞腔室技术（GRID技术），通过每个微小、光学清晰且无边缘效应的腔室，实现了单细胞的清晰可视化。设备将GRID技术与可视化分选相结合，确保腔室内只有单个细胞，通过自动化微流控技术挑选单个细胞用于下游应用，或直接在GRID腔室内培养，高成活率的单克隆细胞系得到保证。

isoCell系统的自动化流程、温和操作条件、全流程可视化监控、100%的单细胞分离效率、高成活率的单克隆细胞系构建，以及直接转移至PCR管或96孔板的能力，使其成为单细胞分选与培养领域的领先技术。isoCell系统在Cell、Advanced Science、Small Methods、Nature Communications等知名期刊上发表多篇文章，展示其在科研领域的广泛应用。

isoCell系统的优势包括全自动化流程、温和操作条件、全培养和分析流程追踪、100%的单细胞分离效率、高成活率的单克隆细胞系构建、直接转移至PCR管或96孔板的能力和紧凑体积，展现了其在单细胞研究中的卓越性能。

Quantum Design中国提供了样机演示实验室，为科研工作者提供专业的售前、销售、售后技术支持，欢迎各位老师预约体验，亲身体验isoCell系统的强大功能。

㈡ 细胞培养常用器材有哪些

1. 超净工作台

目前绝大部分细胞实验室使用超净工作台实现无菌操作，具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。安徽人和净化为您介绍两种主要超净工作台-侧流式（垂直式）和外流式（水平层流式）。工作原理一般是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。

（1） 侧流式工作台：空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌，工作台结构为封闭式；

（2） 外流式工作台：净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作，工作台结构为开放式，但进行有害物质实验操作对操作者不利。超净工作台应需要定期请有关部门检查洁净度，符合要求的超净工作台其洁净度应达到100级，用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应超过3.5个/L；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s；细菌菌落数平均<1个，根据无菌状况必要时需要置换过滤器。

2. 显微镜

倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规必备设备，主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有无污染发生。如资金允许，建议选用配置有照相系统的高品质相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等，可随时拍摄并记录细胞生长情况。

3. 培养箱

体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，一般最适生长温度为37℃，温差变化不应超过±0.5℃。温度升高2℃时，变不利于细胞生存，温度达到40℃以上细胞将很快死亡。因此，可精确控温的恒温培养箱、CO2培养箱是最佳选择。

（1） 恒温培养箱：应选隔水式或晶体管式自控温培养箱，此类培养箱灵敏度高，温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较便宜，其缺点是只宜于作密闭式培养。

（2） CO2培养箱：目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2（常用浓度为5％），易于稳定培养液pH，适用于开放或半开放培养。使用培养瓶时，为使培养瓶内与外界保持通气状态，可将瓶盖略微旋松，为避免细胞被污染，使用这种培养方式时，培养箱内空气必须保持清洁，需定期用紫外线照射或酒精消毒，同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽，防止培养液蒸发，保持箱内相对湿度在100%。

（3） 细胞培养耗材：培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶。

4. 烘箱（干燥箱）

用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，烘箱内温度一般要达到160℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至100℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至100℃以下后可开门。

5. 水纯化装置

细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先经过严格的纯化处理。目前有多种纯化方法相结合，可使普通水纯化为纯水和超纯水的纯水装置使用非常灵活方便，可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液枪、还可根据各类实验用水要求选择配置杀菌功能，有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，更有可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水装置。

6. 冰箱

细胞培养实验室必备设备，应专用，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。一般包括普通冰箱、低温冰箱和超低温冰箱。

普通冰箱：储存培养液、生理盐水、Hanks液试剂等培养用的物品，可短期保存组织样本。

-20℃低温冰箱、超低温冰箱：用于储存需要冷冻以保持生物活性以及需长时期存放的制剂，如酶、血清等。

7. 细胞冷冻储存器

储存器常用的液氮容器，根据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素：容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L，可以储存1ml的冻存管250-15000个左右。液氮温度最低文帝可达-196℃，使用时应注意避免冻伤。由于液氮易挥发，需注意观察剩余液氮量，及时补充，避免液氮不足使细胞受损或死亡。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择，可配置有电子控制器的液氮储存器，实现冻存自动化；并可监测液氮水平和样品温度，确保样品温度始终处于设定温度点；可配置报警系统，设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警；同时具备热气体旁路系统，防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐，从而更有效地保护样品，防止容器内升温。另外，可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮，保证样品安全。

8. 离心机

细胞培养时，通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机；若要做细胞沉降，需要使用80-100G离心力，因为离心力过大会损伤细胞。根据不同要求，有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。

9. 天平

常用的有精密天平和分析天平。分析天平的精确度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平：取样量大于100mg宜选用精确度0.1mg的天平；取样量100-10mg，选用精确度0.01mg的天平；取样量10mg宜选用精确度0.001mg的天平。天平需要定期校准，可选择有自动校准功能的天平，方便维护。天平使用需要注意清洁，避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。答案来自

㈢ 细胞动力学的五类模型

体外细胞培养机械加力装置常用模型：
1、FX-5000T细胞拉应力加载装置模型

1）该系统对二维、三维细胞和组织提供轴向和圆周应力加载；2）基于柔性膜基底变形、受力均匀;3）可实时观察细胞、组织在应力作用下的反应;4）可有选择性地封阻对细胞的应力加载;5）同时兼备多通道细胞压力加载功能;6）与Flex Flow平行板流室配套，可以在牵拉细胞的同时
施加流体切应力;7）多达4通道，可4个不同程序同时运行，进行多个不同拉伸形变率对比实验；8）同一程序中可以运行多种频率，多种振幅和多种波形；9）更好地控制在超低或超高应力下的波形；10）多种波形种类：静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形以及各种特制波形；
11)电脑系统对牵张拉伸力加载周期、大小、频率、持续时间精确智能调控
典型应用范围：加载分析各种细胞在应力刺激下的生物化学反应:
例如：骨骼细胞、肺细胞、心肌细胞、血细胞、皮肤细胞、肌腱细胞、韧带细胞、软骨细胞和骨细胞、肾膀胱细胞、平滑肌细胞/尿路上皮及尿路上皮细胞、眼上皮细胞、眼小梁组织细胞、肾小管上皮细胞、肠上皮细胞、胃上皮细胞等细胞牵张拉伸力加载。2、FX-5000C细胞压应力加载装置模型
1）该系统对各种组织、三维细胞培养物提供周期性或静态的压力
加载；
2）基于柔性膜基底变形、受力均匀;
3）可实时观察细胞、组织在压力作用下的反应;
4）可有选择性地封阻对细胞的应力加载;
5）同时兼备多通道细胞牵拉力加载功能;
6）多达4通道，可4个不同程序同时运行，进行多个不同压
力形变率对比实验；
7）同一程序中可以运行多种频率(0.01- 5 Hz)，多种振幅和多种波形；
8）更好地控制在超低或超高应力下的波形；
9）多种波形种类：静态波形、正旋波形、心动波形、三角波形、矩形以及各种特制波形；
10)电脑系统对压力加载周期、大小、频率、持续时间精确智能调控典型应用范围：
检测各种组织和细胞在压力作用下的生物化学反应，例如：胃上皮细胞、肠上皮细胞、软骨组织， 椎间盘骨组织，肌腱组织，韧带组织，以及从肌肉、肺（肺细胞）、心脏、血管、皮肤、肌腱、韧带、软骨和骨中分离出来的细胞。3、组织工程三维细胞组织拉力加载装置模型
1）.对生长在三维状态下的细胞及组织进行单轴向或者双轴向
的静态或者周期性的应力加载实验，可智能、精准诱导来自各种细
胞、组织在拉应力作用下发生的生化生理变化，专业、细腻的阐释了
体外细胞、组织机械力刺激加载、力学信号感受和响应机制。对研究
细胞的形态结构及功能，细胞的生长、发育、成熟、增殖、衰老、凋
亡、死亡及癌变以及通路表达，细胞信号传导及基因表达的调控，细胞的分化及其调控机理具有重要意义；
2）为体外培育的细胞提供精确的，可控制的，可重复的，静态的或者周期性的
应力变化；
3）.可感应各种细胞、组织在应力刺激下的生物化学反应，例如：骨骼细胞、肌腱细胞、韧带细胞、
软骨细胞、成骨细胞以及肺细胞、心肌细胞、上皮组织细胞的机械力加载培养；
4）特制的显微附属设备，在细胞及组织加力刺激培养的同时，实时观察细胞组织在力刺激下的反应；
5）.使用Flexcell专门程序，可建立特制的各种模拟实验，如心率模拟实验，步行模拟实验，跑动模拟
实验和其他运动力模拟实验；
6）可在体外模拟仿真体内各种细胞组织动力学周期过程，如静态波形、正旋波形、心动波形、三角
波形、矩形波形以及各种特制波形；
7）.可使用种子细胞构建长度达35mm的生物人工组织，并可在体外模拟仿真体内力学环境进行培养测
试组织力属性；
8）.真正意义上的三维培养—该系统以水凝胶为细胞外基质支架，水凝胶支架液态时包裹细胞，固态时形成
交联网络，细胞粘附力强,良好水分、养分交换，同时又可以逼真模拟体内细胞组织力学环境；
9）.三维组织培养模具和三维细胞培养板类型丰富，具有亲水氨基酸、胶原（I型或IV）、弹性蛋白、
ProNectin（RGD）包被表面、层粘连蛋白（YIGSR）包被表面，细胞粘附能力强。科研者根据自己的细胞组
织，有针对性的选择适合包被表面三维培养板；
10）.特制梯形三维培养模具，可以进行三维肌腱、肌肉组织、软骨组织的培养
4、STR-4000细胞流体切应力加载装置模型
为细胞提供各种形式的流体切应力：稳流式切应力、脉冲式切应力
或者往返式切应力。
在经过特殊基质蛋白包被的25x 75x 1.0mm细胞培养载片上
培养细胞。
计算机控制的蠕动泵可以调节切应力大小从0-35 dynes/cm
通过Osci-Flow液体控制仪提供往返式或脉冲式流体切应力。
检测细胞在液流作用下的排列反应。
设备易拆卸并可高温消毒。
可以在经过特殊包被的6个细胞培养载片上同时培养细胞。
提供两个液流脉冲阻尼器。
5、Flexflow系流体切应力与拉力同时混合加载装置模型
FlexcellFlexFlow显微切应力加载设备（SHEAR Stress device）
1）可以在提供流体切应力的同时抻拉细胞，测试血管和结绨组织
细胞对液体流动的实时反应。
2）为培育在StageFlexer硅胶模表面或者基质蛋白包被的细胞培养
片上的细胞提供切应力。
3）使用FX-5000T应力加载系统抻拉细胞，并且可以在实验前，
实验中或者实验后提供切应力。
4）计算机控制蠕动泵，调节切应力大小，从0-35 dynes/cm2
5）使用标准正立式显微镜实时观察细胞在切应力下的反应。
6）检测细胞在流体作用下的排列反应。
7）检测在液体切应力下各种激活剂/抑制剂对细胞反应的影响。
使用荧光团例如FURA-2检测细胞内[Ca2+]ic或者其它离子对切应力反应。