Ⅰ 哪些人应该做ctc检测去哪里做有做过的朋友推荐下
CTC检测适用于以下人群：
1、对于健康人群及肿瘤易感人群早期筛查
通过检查健康人血液中是否存在循环肿瘤细胞来早期检测肿瘤的发生，建议每年检测一次，以期在肿瘤萌芽阶段就能检测到，从而保证早期治愈率。而有癌症家族史人群，患有HPV阳性、慢性肝炎、慢性胃炎、慢性肠炎等人群，长期吸烟者，经常接触有毒有害物质者，生活压力大、精神高度紧张的亚健康人群，以及基因检测肿瘤易感性风险等级高者，建议每3个月或者半年检测一次。
2、对于正在接受治疗的肿瘤患者，需连续检测，以获得CTC数量变化趋势
(1)CTC数量显著减少或消失，提示患者可从当前治疗中获益，建议每个治疗周期开展前检测一次;
(2)CTC数量继续增加或无显著减少，提示患者前期治疗效果不佳，或患者对治疗产生耐药，存在疾病恶化风险，建议由专业医师结合其它检测方法对病情进行综合评估。
3、对于肿瘤患者复发监测
(1)未检出CTC，提示患者当前病情稳定或预后良好，建议每3-6个月检测一次;
(2)检出CTC，提示患者存在较高的肿瘤复发/转移风险，建议由专业医师结合其它检测方法对病情进行综合评估。
如果亲想做CTC检测，建议到正规机构做，比如上海美吉医学检验所，以保障结果的准确，以避免上当受骗!
Ⅱ DG55155Tl设置方法
团体标准T/CVMA 5—2018
非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法
Real-time PCR assay for detection ofAfrican swine fever virus
中国兽医协会发布
前言
本标准按 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中国兽医协会提出并归口。
本标准起草单位： 中国动物疫病预防控制中心、中国兽医药品监察所、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国农业科学院兰州兽医研究所、北京海关。
本标准主要起草人： 倪建强、王传彬、王琴、仇华吉、殷宏、杨林、辛盛鹏、刘艳华、刘洋、宋晓晖、赵启祖、罗玉子、刘志杰、张乾义、乔彩霞、夏应菊、杨吉飞、徐璐、顾小雪、亢文华、李硕、毕一鸣。
1、范围
本标准规定了非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的试剂、仪器和耗材、操作步骤、结果判定、实验室生物安全等技术要求。
本标准适用于猪脾脏、淋巴结、血液等组织和血粉中非洲猪瘟病毒核酸的检测。
2、规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
3、试剂
3.1 DNA提取试剂
DNA提取试剂的配制见附录A，或选取商品化的病毒DNA提取试剂盒并参照说明书进行DNA提取。
3.2 2 × PCR缓冲液
2 × PCR缓冲液的配制见附录A。
3.3 引物探针
3.3.1 采用针对非洲猪瘟病毒VP72基因（核苷酸序列见附录B）的引物及探针：
上游引物ASF-CADC-rPCRF：5'-1528-ATAGAGATACAGCTCTTCCAG-1548-3'
下游引物ASF-CADC-rPCRR：5'-1660-GTATGTAAGAGCTGCAGAAC-1679-3'
荧光探针ASF-CADC-Probe：5'-1638-FAM-TATCGATAAGATTGAT-MGB--3'
3.3.2 可以使用世界动物卫生组织（OIE）在陆生动物诊断技术和疫苗手册（Manual of Diagnostic Tests andVaccines for Terrestrial Animals）第2.8.1章African Swine Fever中提供的引物和探针，并按照手册中规定的检测程序和判定标准操作：
上游引物ASF-OIE-rPCRF：5'-1627-CTGCTCATGGTATCAATCTTATCGA-1651-3'
下游引物ASF-OIE-rPCRR：
5'-1857-GATACCACAAGATCRGCCGT-1876-3'
荧光探针ASF-OIE-Probe：
5'-1761-FAM-CCACGGGAGGAATACCAACCCAGTG-TAMRA-1785-3'
3.3.3 使用国家农业行政主管部门批准的其他引物、探针，应对检测程序和判定标准作相应调整。
3.4 阴性及阳性对照
阴性及阳性对照的制备方法见附录C。
3.5 其他试剂
消毒液、5U/μLTaq DNA聚合酶、无菌无核酸酶水、0.01mol/L PBS（pH7.2）。
消毒液配制见附录A， 0.01mol/L PBS配制见附录A。
4、仪器和耗材
分析天平（感量0.1mg）、高速台式冷冻离心机（最高离心速度不低于12 000r/min）、冰盒、实时荧光PCR仪及配套反应管（板）、组织研磨器、-20℃冰箱、可调移液器（2 μL，20 μL，200μL，1 000 μL）、1.5mL离心管（无核酸酶）。
5、操作步骤
5.1 样品采集及运输
样品采集及运输按照NY/T541的规定执行，采集猪的脾脏、淋巴结、血液等组织材料或血粉用于检测，样品应在冷藏条件下尽快运输至实验室，避免反复冻融。采样时应穿戴个人生物安全防护装备，实施现场消毒和废弃物处理。
5.2 样品处理
检测前样品应在二级生物安全柜中处理。取0.1g～0.2g组织或血粉，经研磨破碎后加1mL的0.01mol/L PBS（pH7.2）制成匀浆，经12 000 r/min离心2Min取上清；全血、血清样品直接取1mL，置于1.5 mL离心管内盖紧管帽。将上述处理的样品置于60℃条件下灭活30min。
5.3 样品保存
采集或处理好的样品在2℃～8℃条件下保存应不超过24 h；如需长期保存，应放置-70℃冰箱，但应避免反复冻融（冻融不超过3次）。
5.4 病毒DNA提取
5.4.1 DNA提取应在样本制备区内采用以下方法进行，若使用其他等效的病毒DNA提取试剂，则按照试剂说明书操作。
5.4.2 待检样品、阳性对照和阴性对照的份数总和用n表示，取n个灭菌1.5 mL离心管，逐管编号。
5.4.3 每管加入200μL DNA提取液1，然后分别加入待测样品、阴性对照和阳性对照各200μL，1份样品换用1个吸头，混匀器上震荡混匀5s。于4℃～25℃条件下，13 000 r/min离心10 min。DNA提取液1见附录A。
5.4.4 尽可能吸取上清、弃去，吸头不要碰到沉淀，再加入10 μL DNA提取液2，混匀器上震荡混匀5 s。于4℃～25℃条件下，2 000 r/min离心10s。DNA提取液2见附录A。
5.4.5 100℃干浴或沸水浴10 min。
5.4.6 加入90μL无DNA酶的灭菌去离子水，13 000 r/min离心10 min，上清即为提取的DNA，-20℃保存备用。无DNA酶的灭菌去离子水见附录A。
5.5 实时荧光PCR操作
5.5.1 在反应混合物配制区、样品制备区和检测区分别进行5.5.2～5.5.4。
5.5.2 每个检测反应体系需使用20μL实时荧光PCR反应液。根据5.4.2中设定的n值，按附录D配制反应液，充分混匀后分装，每个PCR反应管20μL。转移PCR反应管至 样品制备区 。
5.5.3 在上述5.5.2的反应管中分别加入5.4中提取的DNA溶液5μL，使每管总体积达到25 μL，记录反应管对应的样品编号。盖紧管盖后，瞬时离心。
5.5.4 将5.5.3加样后的反应管放入实时荧光PCR检测仪内，记录反应管摆放顺序。选定5-羧基荧光素（FAM）作为报告基团，小沟结合物（MGB）为淬灭基团，反应参数设置如下： 预变性95℃/3 min；95℃/15 s，52℃/10 s，60℃/35 s，45个循环； 在每次循环的60℃退火延伸时收集荧光。试验结束后，根据收集的Ct值和荧光曲线判定结果。
6、结果判定
6.1 结果分析条件设定
实时荧光PCR检测阈值设定原则：阈值线超过阴性对照扩增曲线的最高点，且相交于阳性对照扩增曲线进入指数增长期的拐点，或根据仪器噪声情况进行调整。每个样品反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数即为Ct值。
6.2 结果描述及判定
当阳性对照Ct值≤28.0且出现典型扩增曲线，阴性对照无Ct值无扩增曲线时，实验成立，实例参考附录E。 当被检样品出现典型的扩增曲线且Ct值≤38.0时，判为非洲猪瘟病毒核酸阳性 ； 被检样品无Ct值，判为非洲猪瘟病毒核酸阴性；对于Ct值＞38.0的样品且出现典型的扩增曲线，应重检，重检仍出现上述结果的判为阳性，否则判为阴性。
7、实验室生物安全要求
7.1 本方法涉及非洲猪瘟感染性样品的实验操作应在（动物）生物安全三级试验室中进行，实验室生物安全管理要求见GB 19489。国家农业行政主管部门另有规定的，按其规定执行。
7.2 使用过的实验器材和液体废弃物应先经过消毒液浸泡处理，再经高温高压处理后废弃。剩余样品等固体废弃物应在生物安全柜中密封包装，经表面消毒后移出，再经高温高压处理后废弃。
一
附录 A (规范性附录) 试剂的配制
A.1 DNA提取液1
PEG8000晶体20.74g，NaCL17.53g，加去离子水定容到100 mL。
A.2 DNA提取液2
1mol/LTris.Hcl 2 mL，2 mol/L KCL5 mL，0.5 mol/L EDTA 0.5 mL，NP-40 1 mL，加去离子水定容到100 mL。
即KCL14.912g，Tris碱12.114g，1.2068 mL浓HCl，EDTA14.612g，NaOH 6g, 加去离子水定容到100 mL。
A.3 2×PCR缓冲液
灭菌去离子水 70 mL
三羟甲基氨基甲烷（Tri s） 0.79 g
氯化钾 1.865 g
曲拉通X-100 0.5 mL
dATP (100mmol/L) 2.5 mL
dTTP (100mmol/L) 2.5 mL
dGTP (100mmol/L) 2.5 mL
dCTP (100mmol/L) 2.5 mL
六水氯化镁 0.61 g
盐酸 调pH至9.0
灭菌去离子水 加至100 mL
A.4 消毒液
8‰氢氧化钠或3‰福尔马林或3%邻苯基苯酚或碘化合物等其他消毒试剂均可。
A.5 磷酸盐缓冲液（PBS）的配方
A.5.1 A液
0.2mol/L磷酸二氢钠水溶液：NaH2PO4·H2O 27.6 g，溶于蒸馏水中，最后定容至1 000 mL。
A.5.2 B液
0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液：Na2HPO4·7H2O 53.6 g（或Na2HPO4·12H2O 71.6 g或Na2HPO4·2H2O 35.6 g），加蒸馏水溶解，最后定容至1 000 mL。
A.5.3 0.01 mol/L、pH 7.2 磷酸盐缓冲液（PBS）的配制
取A液14 mL、B液36 mL，加NaCl 8.5 g，用蒸馏水定容至1 000 mL。经过滤除菌后，无菌条件下分装。
A.6 无DNA酶的灭菌去离子水
无DNA酶的灭菌去离子水是用1 %DEPC处理后的去离子水，电阻应该大于18.2mΩ。
二
附录B （资料性附录）非洲猪瘟病毒VP72基因参考序列
1ATGGCATCAG GAGGAGCTTT TTGTCTTATT GCTAACGATG GGAAGGCCGA CAAGATTATA
61TTGGCCCAAG ACTTGCTGAA TAGCAGGATC TCTAACATTA AAAATGTGAA CAAAAGTTAT
121GGGAAACCCG ATCCCGAACC CACTTTGAGT CAAATCGAAG AAACACATTT GGTGCATTTT
181AATGCGCATT TTAAGCCTTA TGTTCCAGTA GGGTTTGAAT ACAATAAAGT ACGCCCGCAT
241ACGGGTACCC CCACCTTGGG AAACAAGCTT ACCTTTGGTA TTCCCCAGTA CGGAGACTTT
301TTCCATGATA TGGTGGGCCA TCATATATTG GGTGCATGTC ATTCATCCTG GCAGGATGCT
361CCGATTCAGG GCACGTCCCA GATGGGGGCC CATGGGCAGC TTCAAACGTT TCCTCGCAAC
421GGATATGACT GGGACAACCA AACACCCTTA GAGGGCGCCG TTTACACGCT TGTAGATCCT
481TTTGGAAGAC CCATTGTACC CGGCACAAAG AATGCGTACC GAAACTTGGT TTACTACTGC
541GAATACCCCG GAGAACGACT TTATGAAAAC GTAAGATTCG ATGTAAATGG AAATTCCCTA
601GACGAATATA GTTCGGATGT CACAACGCTT GTGCGCAAAT TTTGCATCCC AGGGGATAAA
661ATGACTGGAT ATAAGCACTT GGTTGGCCAG GAGGTATCGG TGGAGGGAAC CAGTGGCCCT
721CTCCTATGCA ACATTCATGA TTTGCACAAG CCGCACCAAA GCAAACCTAT TCTTACCGAT
781GAAAATGATA CGCAGCGAAC GTGTAGCCAT ACCAACCCGA AATTTCTTTC ACAGCATTTT
841CCCGAGAACT CTCACAATAT CCAAACAGCA GGTAAACAAG ATATTACTCC TATCACGGAC
901GCAACGTATC TGGACATAAG ACGTAATGTT CATTACAGCT GTAATGGACC TCAAACCCCT
961AAATACTATC AGCCCCCTCT TGCGCTCTGG ATTAAGTTGC GCTTTTGGTT TAATGAGAAC
1021GTGAACCTTG CTATTCCCTC AGTATCCATT CCCTTCGGCG AGCGCTTTAT CACCATAAAG
1081CTTGCATCGC AAAAGGATTT GGTGAATGAA TTTCCTGGAC TTTTTGTACG CCAGTCACGT
1141TTTATAGCTG GACGCCCCAG TAGACGCAAT ATACGCTTTA AACCATGGTT TATCCCAGGA
1201GTCATTAATG AAATCTCGCT CACGAATAAT GAACTTTACA TCAATAACCT GTTTGTAACC
1261CCTGAAATAC ACAACCTTTT TGTAAAACGC GTTCGCTTTT CGCTGATACG TGTCCATAAA
1321ACGCAGGTGA CCCACACCAA CAATAACCAC CACGATGAAA AACTAATGTC TGCTCTTAAA
1381TGGCCCATTG AATATATGTT TATAGGATTA AAACCTACCT GGAACATCTC CGATCAAAAT
1441CCTCATCAAC ACCGAGATTG GCACAAGTTC GGACATGTTG TTAACGCCAT TATGCAGCCC
1501ACTCACCACG CAGAGATAAG CTTTCAGGAT AGAGATACAG CTCTTCCAGA CGCATGTTCA
1561TCTATATCTG ATATTAGCCC CGTTACGTAT CCGATCACAT TACCTATTAT TAAAAACATT
1621TCCGTAACTG CTCATGGTAT CAATCTTATC GATAAATTTC CATCAAAGTT CTGCAGCTCT
1681TACATACCCT TCCACTACGG AGGCAATGCG ATTAAAACCC CCGATGATCC GGGTGCGATG
1741ATGATTACCT TTGCTTTGAA GCCACGGGAG GAATACCAAC CCAGTGGTCA TATTAACGTA
1801TCCAGAGCAA GAGAATTTTA TATTAGTTGG GACACGGATT ACGTGGGGTC TATCACTACG
1861GCTGATCTTG TGGTATCGGC ATCTGCT
三
附录C （规范性附录）非洲猪瘟病毒核酸阳性及阴性对照
C.1阳性对照
阳性对照制备方法：人工合成非洲猪瘟病毒VP72基因片段，序列参见附录B，将VP72基因连接于pMD20-T载体制成阳性质粒pMD20-T-VP72，使用非洲猪瘟病毒阴性猪的组织研磨液将质粒稀释至浓度为10 000copies/L，保存于-20℃备用。
C.2 阴性对照
阴性对照为非洲猪瘟病毒阴性猪的组织研磨液。
四
附录D （规范性附录）实时荧光PCR反应液配方
实时荧光PCR反应液配方见表D.1。
表D.1 实时荧光PCR反应液配方
组 分
1个检测体系的加入量
2×PCR 缓冲液a
12.5μL
dNTP（2.5 mmol/L）
1.0 μL
上游引物（10 μmol/L）
1.0 μL
下游引物（10 μmol/L）
1.0μL
探针（10 μmol/L）
1.0 μL
Taq 酶b（5U/μL）
0.5μL
去离子水
3μL
总体积
20μL
2×PCR 缓冲液a: 参见附录A.1配方。
Taq 酶b：具有5’→3’外切活性。
五
附录 E （资料性附录）非洲猪瘟病毒实时荧光PCR扩增实例参考
图D.1给出了非洲猪瘟病毒实时荧光PCR扩增实例。
图E.1 非洲猪瘟病毒核酸实时荧光PCR典型扩增曲线示意图
(资料来源：中国兽医协会）
Ⅲ 电流互感器现场校验装置的作用是什么
GYCTC电流互感器现场校验装置由调压器、互感器负荷箱、互感器校验仪等组成.用于电流互感器的校验.
1、电流互感器误差现场测试仪同时具有递推法测量电流互感器误差、电位差法测量电压互感器误差功能于一身，方便现场开展计量装置现场检定工作。
2、现场检定电流互感器无需标准电流互感器、升流器、负载箱、调压控制箱以及大电流导线，使用极为简单的测试接线和操作实现电流互感器的检定，极大的降低了工作强度和提高了工作效率，方便现场开展互感器现场检定工作。
3、电流互感器误差现场测试仪内部具有相当于被测电流互感器同变比的标准电压互感器，其准确度可以达到0.05级，准确的测量出被测电流互感器的变比和空载误差。然后结合阻抗与导纳的测试结果推算出互感器的误差。
4、采用接近工频的异频功率电源测试，防止现场工频电磁辐射和串联干扰。
5、测量范围宽，可以至5A/5A~25000A/5A或5A/1A~5000A/1A。
6、具有电流互感器变比、二次绕组内阻测试功能。
7、采用640×480高分辨率大屏幕液晶显示，具有人性化的界面及操作设计，使用触摸屏辅助操作，使操作变的更加方便、快捷。
8、采用精准的软件算法，测量数据的准确性进一步提高。
9、具有智能判断外接线状况，提示接线错误、变比、极性错误等。
10、 自动对测试数据进行化整，并判断是否超差，超差数据使用反黑框显示，对互感器的数据特性显示直观明了。
11、 直接出具现场检定结论，判定合格或不合格。
12、 大规模存贮器可存储现场测试数据多达1000条。
13、 带有打印机，可以现场打印测试数据。
14、 采用工程塑料模具机箱防震、防压，保障现场操作人员的安全和设备安全。
Ⅳ 娴佸紡缁嗚優浠鍙浠ュ垎閫夊惊鐜鑲跨槫缁嗚優鍚
鍦ㄤ竴浜涚檶鐥囨偅鑰呯殑琛娑蹭腑锛屼汉浠鍙戠幇浜嗙綍瑙佺殑寰鐜鑲跨槫缁嗚優锛坈irculating tumor cells锛孋TC锛夈傝繖浜涚粏鑳炶璁や负浠ユ煇绉嶆柟寮忎粠鎭舵ц偪鐦ら噴鏀惧埌琛娑蹭腑銆傛ゅ栵紝瀹冭繕鍙鑳藉弬涓庝簡缁у彂鑲跨槫褰㈡垚鐨勮浆绉昏繃绋嬨
濡傛ょ湅鏉ワ紝CTC瀵圭檶鐥囩爺绌跺緢閲嶈併傚綋鐒讹紝瀹冧篃鏄鐩稿綋澶嶆潅銆侰TC閫氬父鏄缁嗚優瑙掕泲鐧介槼鎬э紙CK+锛夊拰CD45闃存э紙CD45-锛夛紝浣嗗苟闈炴绘槸濡傛ゃ傚湪涓浜涚檶鐥囦腑锛屼笂鐨缁嗚優绮橀檮鍒嗗瓙EpCAM瀛樺湪浜嶤TC琛ㄩ潰锛岃屽彟涓浜涚檶鐥囧嵈涓嶆槸銆侰TC姣旀穻宸寸粏鑳炲ぇ锛岄櫎浜嗕竴浜涒滃皬CTC鈥濅簹鍨嬨傚嵆浣挎槸鏉ヨ嚜鍚屼竴浣嶆偅鑰呭悓涓娆℃娊琛鐨勬牱鏈锛孋TC涔熷彲鑳藉瓨鍦ㄩ仐浼犲紓璐ㄦс
涓村簥鍖荤敓甯屾湜鏈変竴澶〤TC鐨勬恫浣撴椿妫鍒嗘瀽鑳藉熷彇浠ｄ镜鍏ユх殑瀹炰綋鐦ゆ椿妫銆傚緢鏄剧劧锛屾垜浠杩橀渶瑕佹繁鍏ヤ簡瑙ｈ繖浜涘嶆潅鐨勭粏鑳炪傛ゅ栵紝CTC鍦ㄨ娑叉牱鏈涓鐨勫嚭鐜颁篃鏈夌潃棰勫悗鐨勬剰涔夈侰TC鏄鐧岀棁涓鐨勬崳铔嬮硷紝瀹冧滑鐨勫瓨鍦ㄤ笌棰勫悗涓嶈壇鏈夊叧銆
CTC鐨勭綍瑙佸張浣垮緱鐮旂┒鏋佸叾鍥伴毦銆傚湪涓澶у爢鏈変簺鐩镐技鐨勭櫧缁嗚優涓锛孋TC鐨勫嚭鐜版傜巼澶ф傛槸鐧句竾鍒嗕箣涓銆傚嵆浣挎槸鐥呬汉锛屽父瑙勬娊琛鐨勬牱鏈涓涔熷彧鏈10涓鎴栦互涓嬬殑CTC銆備簡瑙ｈ繖绉嶉珮搴﹀嶆潅鑰屽張鏋佸叾缃曡佺殑缁嗚優锛屾垚涓轰复搴婄爺绌剁殑鐩鏍囥
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涓轰簡鑾峰緱鏈浣崇殑缁撴灉锛孋TC鐨勬牱鍝佸埗澶囧拰鍒嗘瀽搴斿綋杞绘煍鑰屽揩閫熴傗淐TC鏄绋鏈夈佽剢寮憋紝骞跺规椂闂存晱鎰熺殑锛屸濊禌榛橀炰笘灏旂殑楂樼骇宸ョ▼甯圡ike Ward鎸囧嚭銆傗滃傛灉浣犺兘鍑忓皯鏍峰搧鍒跺囨ラわ紝閭ｄ箞浣犲垎鏋怌TC鐨勬満浼氬皢浼氭彁楂樸侫ttune NxT娴佸紡缁嗚優浠鐨勫ぇ鏍峰搧閲忔槸涓浼樺娍锛岃╀綘涓嶅啀闇瑕侀氳繃绂诲績鎴栧叾浠栨柟寮忔祿缂╀綘鐨勭粏鑳烇紝閭ｆ牱鍙鑳戒細閫犳垚缁嗚優鎹熷け鎴栦激瀹炽傗
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