❶ 关于血球仪的测量方法
血球仪的测量方法:
1、采血
血液分析一般要求用抗凝的静脉血,尽可能不用末梢皮肤穿刺采血。因为不同部位皮肤穿刺血的细胞成分及细胞与血浆的比例常不一致,与静脉血的差别更大。从技术角度讲,毛细血管采血量较少,全自动的血液分析仪需血量较大,不易采到足够量,更不能在需要的时候进行重复检查,因此除了少数不易取静脉血如婴儿、大面积烧伤的病人及某些需要经常采血检查的病例,如白血病、肿瘤放疗或化疗病人外,均应采用静脉血检测。
2、容器的选择
存放抗凝血的容器应尽量采用密闭式的,以防止水分蒸发或环境污染等方面的影响。为了减少对血小板分析的影响,应使用塑料试管,采血后应立即混匀。如果采用玻璃制品应首先对容器进行硅化处理,以防止血小板黏附,造成血小板计数的减少。
目前在发达国家普遍使用真空采血系统,这一系统使标本在采血和测试期间完全与外界隔离,避免空气或异物污染血液,也防止发生溶血,提高检测准确性,同时也防止采血及检验人员因直接接触血液而受到感染的危险。
3、抗凝剂
国际血液标准化委员会(ISCH)推荐使用的抗凝剂是EDTA二钾,含量规定为1.5-2.2mg/ml血。此抗凝剂不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响也最小,并且可以抑制血小板的聚集。EDTA二钠用于血常规检查与EDTA二钾抗凝血的结果相比无明显变化,但其溶解度较低,抗凝速度慢,不适合末梢血的抗凝。
需要注意的是EDTA二钾可以使红细胞体积轻度膨胀,采血后短时间内MPV非常不稳定,半小时后方趋于平稳。枸橼酸盐类抗凝剂对MPV及其他凝血因子影响极小,可用于血小板的分析。
4、稀释标本
在使用半自动血液分析仪时,血液需要经过预稀释以后方能检验,应特别注意稀释溶血现象。稀释溶血是指血液经高倍稀释后,随着放置时间的延长血细胞自行溶解的现象。所以血液稀释后应尽快测定,以避少数量的减低。
5、溶血标本对分析结果的影响
由于标本的处理不当,例如采血不顺利、剧烈震荡等,可以造成标本试管内溶血。溶血严重的标本可以使红细胞和血球压积下降、血红蛋白相对增加,导致MCH和MCHC增高,而平均红细胞体积正常。这一结果可以使临床医生作用错误的判断,造成不良后果。所以对于溶血的标本,应重新采集标本后测定。
6、存放时间对结果的影响
抗凝全血在室温的条件下进行仪器测定,红细胞、白细胞和血小板各项指标可以稳定24个小时,白细胞分类可稳定6-8小时,血红蛋白可稳定数日。但如果在显微镜下进行白细胞分类,两小时后粒细胞形态即有变化,所以如果需要做显微镜形态学检查,应及早推制血片。虽然4摄氏度条件可延长血液储存期,但血小板不宜在低温下储存,会影响计数和体积,因此如不能及时检测血液应在室温下保存。
很多文献报道EDTA盐抗凝的静脉血,在采血后的一小时内检测MPV不稳定,血小板体积逐渐增高,可增大20%左右,一小时后趋向平稳,在1-6小时内变化小于3%。这是由于血液与EDTA盐抗凝剂混合后,血小板形状由凹形变为球形,体积增大的原因。所以为了结果的准确性,应该在一小时后进行测定。
我们发现用EDTA抗凝的末梢血也应至少在15分钟以后进行测定,因为在这段时间内有些标本血小板暂时的聚集现象,使血小板计数假性减少,这不仅影响血小板其它指标的准确性,也造成白细胞计数有所增高。取血后立刻检测,标本的血小板和白细胞体积分布直方图也是异常的,放置一段时间后再测定就可得到分布正常的直方图
7、溶血剂的用量及溶血时间
全自动血液分析仪可以控制溶血剂的加入量及溶血剂作用时间。但在使用半自动血细胞计数仪进行血细胞计数时,需要在血液预稀释后人工加入溶血剂,溶血以后再进行血细胞计数和分类计数,正确掌握溶血剂用量及溶血时间非常重要。如果加入量不足或加入后放置时间过短,可以造成溶血不完全,使未溶解的红细胞计入白细胞中,造成白细胞假性增加。溶血不完全也可影响血红蛋白的准确性。如果加入溶血剂量过多或放置时间太久白细胞明显变形,使白细胞直方图异常,白细胞分类计数结果不准确,甚至不能进行分类计数。